BD, 554613, BD Pharmingen™ IL-12 humana recombinante (p70)

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, la IL-12 p70 humana recombinante (n.º de cat. 554613) debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5 a 10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina humana o bovina, dividirse en alícuotas y almacenarse a -80 °C. Para el uso en ensayos biológicos in vitro, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 0,5 a 1 mg/ml. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5 a 10 mg/ml. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede perderse la actividad. El producto no debe diluirse a menos de 25 μg/ml para el almacenamiento a largo plazo. Las proteínas transportadoras deben analizarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a su toxicidad, altos niveles de endotoxinas o posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: La IL-12 p70 humana recombinante (n.° de cat. 554613) puede ser útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína IL-12 humana mediante ELISA tipo sándwich con el anticuerpo 20C2 purificado (n.° de cat. 555065) como anticuerpo de captura y el anticuerpo C8.6 biotinilado (n.° de cat. 554660) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se recomienda incluir en cada placa ELISA diluciones dobles de IL-12 humana recombinante de 2000 a 15 pg/mL. Para medir la IL-12 humana en suero o plasma, se recomienda encarecidamente a los investigadores utilizar el kit ELISA BD OptEIA™ Human IL-12 (n.º de cat. 555171 para IL-12 p40 humana y n.º de cat. 555183 para IL-12 p70 humana) o el kit ELISA BD OptEIA™ Human IL-12 II (n.º de cat. 551116 para IL-12 p40 humana y n.º de cat. 559258 para IL-12 p70 humana). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de bioensayo no se analiza rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente titularlo e incluir controles adecuados en los experimentos pertinentes. Anteriormente se ha informado de un rango de actividad de 0,2 - 5,0 x 10^8 unidades/mg, que abarca una DE50 = 20 - 500 pg/ml, utilizando células mononucleares de sangre periférica humana (PBMC) activadas con PHA/IL-2 para la proliferación, definiéndose una unidad como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta mitad del máximo en la saturación de citocinas.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.