BD, 554706, BD Pharmingen™ PE Anti-IL-10 humana para ratas

Nombre alternativo: Interleucina-10; CSIF; Factor inhibidor de la síntesis de citocinas; TGIF
Reactividad: Humana (Prueba de control de calidad), Viral (Probado en desarrollo)
Isotipo: IgG2a de rata, κ
Inmunógeno: IL-10 humana recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (probada rutinariamente), captura ELISA, neutralización (probada durante el desarrollo)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395521
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: 1. Tinción inmunofluorescente y análisis por citometría de flujo: El anticuerpo JES3-19F1 conjugado con PE (n.° de cat. 554706) puede utilizarse para la tinción inmunofluorescente multicolor y los análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-10 en poblaciones celulares mixtas (véase la imagen). Para una tinción inmunofluorescente óptima con el análisis por citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo JES3-19F1 conjugado con ligando (p. ej., IL-10 humana recombinante; n.º de cat. 554611) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo JES3-19F1 no marcado (n.º de cat. 554705) antes de la tinción. La técnica de tinción y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo IgG2a de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es PE-R35-95 (n.º de cat. 554689); úselo en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg mAb/1 millón de células). Las BD™ CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar la dispersión de fluorescencia (compensación). Al unir anticuerpos conjugados con fluorocromos a las CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos, pueden presentarse pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de dispersión diferentes a los de los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, se compare la dispersión en las células y en las CompBeads para garantizar que las BD Comp Beads sean adecuadas para su aplicación celular específica. 2. Captura ELISA: El anticuerpo purificado JES3-19F1 (n.º de cat. 554705) es útil como anticuerpo de captura para una prueba ELISA tipo sándwich para la medición específica de los niveles de proteína IL-10 humana. El anticuerpo JES3-19F1 purificado puede combinarse con el anticuerpo JES3-12G8 biotinilado (n.° de cat. 554499) como anticuerpo de detección y con la proteína IL-10 humana recombinante (n.° de cat. 554611) como estándar. Para analizar la IL-10 en suero o plasma, se recomienda nuestro kit OptEIA™ (n.° de cat. 555134). 3. Neutralización: El formato NA/LE™ del clon JES3-19F1 (n.° de cat. 554704) es útil para neutralizar la bioactividad de la IL-10 humana. Un control de isotipo NA/LE de IgG2a de rata adecuado para el anticuerpo NA/LE JES3-19F1 es el anticuerpo R35-95 (n.° de cat. 554687).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Es posible que la reactividad cruzada entre especies detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.