Product Description
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG2a de ratón, κ
Inmunógeno: proteína IP-10 humana recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395670
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo 6D4/D6/G2 conjugado con PE (n.º de cat. 555049) se puede utilizar para la tinción inmunofluorescente multicolor y los análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células humanas productoras de IP-10 dentro de poblaciones celulares mixtas (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente óptima con análisis de citometría de flujo, se debe titular este anticuerpo anticitocina. (≤ 0,5 µg mAb/1X10^6 células) Para conocer la metodología específica, consulte los protocolos en línea o el capítulo sobre tinción intracelular en el manual de función inmunitaria publicado en www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es bloquear previamente las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo 6D4/D6/G2 sin marcar antes de la tinción. La técnica de tinción y el uso de controles de bloqueo se describen en C. Prussin et al. Un control de isotipo de IgG2a de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído y permeabilizadas con saponina es el PE-G155-178 (n.º de cat. 554648); úselo en concentraciones comparables a las del anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg mAb/1 x 10^6 células). ELISA: El anticuerpo biotinilado 6D4/D6/G2 (n.º de cat. 555048) es útil como anticuerpo de detección para un ELISA tipo sándwich para medir específicamente los niveles de proteína IP-10 humana. El anticuerpo biotina 6D4/D6/G2 se puede combinar con el anticuerpo purificado 4D5/A7/C5 (n.° de cat. 555046) como anticuerpo de captura y con la proteína IP-10 humana recombinante (n.° de cat. 551130) como estándar.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Para conocer los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.
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Collaboration
Tony Tang
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