BD, 555052, BD Pharmingen™ Anti-TGF-β1 de ratón, humano y de cerdo purificado

Reactividad: Humana (prueba de control de calidad), Humana, Ratón, Cerdo (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG2a de rata, κ
Inmunógeno: TGF-β1 de ratón recombinante
Aplicación: ELISA (probado rutinariamente), Western blot (reportado)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_395673
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. Conservar sin diluir a 4 °C.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados 1. Captura ELISA: El anticuerpo A75-2 purificado es útil como anticuerpo de captura en un ELISA tipo sándwich para medir TGF-β1 de ratón, humano o porcino, junto con el clon A75-3 anti-TGF-β1 biotinilado (n.º de cat. 555053) como anticuerpo de detección. El anticuerpo purificado debe titularse de 1,0 a 4,0 µg/ml para determinar la concentración óptima para la captura ELISA. Para obtener información sobre la metodología específica, visite la sección de protocolos o el capítulo sobre ELISA en el Manual de Función Inmunitaria, ambos disponibles en www.bdbiosciences.com. Este par de ELISA se recomienda para medir citocinas en sistemas de cultivo celular experimental y no se recomienda para analizar muestras de suero o plasma. Para medir TGF-β1 en suero o plasma, el kit ELISA BD OptEIA™ Human TGF-β1 (n.º de cat. 559119) está especialmente formulado y se recomienda. Importante: Antes del ensayo ELISA para los niveles de proteína TGF-β1, las muestras de fluidos biológicos deben tratarse por acidificación. El protocolo se describe a continuación. Para las muestras de suero, primero diluya el suero en PBS 1:5 (20 µl de suero + 80 µl de PBS), luego agregue 1 N HCl en 1:25 para ajustar a pH 3 (es decir, 4 µl 1 N HCl a 100 µl de suero diluido). Los sobrenadantes celulares pueden tratarse sin diluir con 1 N HCl en 1:25 para ajustar a pH 3 (es decir, 4 µl 1 N HCl a 100 µl de sobrenadante). Incube las muestras acidificadas durante 60 minutos a 4 °C (alternativamente, las muestras pueden tratarse a temperatura ambiente durante 15 minutos). Después de la incubación, neutralice las muestras tratando cada muestra con 1 N NaOH 1:25 y analice inmediatamente o almacene a -70 °C hasta el momento de la prueba. Nota: Este par de ELISA no muestra reactividad cruzada con ninguna de las citocinas analizadas (p. ej., IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-7, IL-9, IL-10, IL-12 p70, IL-15, GM-CSF, IFN-γ, MCP-1, TCA-3, TNF humanas; IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-3 humana IL-4, IL-6, IL-7, IL-8, IL9, IL-10, IL-11, IL-12 p70, IL-12 p40, IL-13, IL-15, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, linfotactina, MCP-1, MCP-2, MIP-1α, MIP-1β, NT-3, PDGF-AA, sCD23, SCF, TNF, LT-α, VEGF; IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, GM-CSF, IFN-γ, TNF de rata).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.