BD, 555109, BD Pharmingen™ TNF recombinante de rata

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, el TNF de rata recombinante (n.º de cat. 555109) debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5 a 10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina humana o bovina, dividirse en alícuotas y almacenarse a -80 °C. Para el uso en ensayos biológicos in vitro, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 0,5 a 1 mg/ml. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5 a 10 mg/ml. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede perderse la actividad. El producto no debe diluirse a menos de 10 μg/ml para el almacenamiento a largo plazo. Las proteínas transportadoras deben analizarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a su toxicidad, altos niveles de endotoxinas o posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: El TNF recombinante de rata (n.° de cat. 555109) puede ser útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína TNF de rata mediante ELISA tipo sándwich con el anticuerpo TN3-19.12 purificado (n.° de cat. 557516) como anticuerpo de captura y el anticuerpo 516D1A1 biotinilado (n.° de cat. 558415) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se recomienda incluir en cada placa ELISA diluciones dobles de TNF recombinante de rata de 10 a 0,1 ng/mL. Para medir el TNF de rata en suero o plasma, se recomienda encarecidamente a los investigadores utilizar el kit ELISA para TNF de rata BD OptEIA™ (n.º de cat. 558535) o el kit ELISA para TNF de rata BD OptEIA™ (n.º de cat. 560479). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de bioensayo no se analiza rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente titularlo e incluir controles apropiados en los experimentos pertinentes. Se ha informado previamente de un rango de actividad de 0,25 a 5,0 x 10^9 unidades/mg, que abarca una DE50 de 2 a 40 pg/ml, utilizando células indicadoras L929 en un ensayo de citólisis con MTT/actinomicina D, definiendo la unidad como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta semimáxima a la saturación de citocinas.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.