BD, 555110, BD Pharmingen™ MCP-1 recombinante de rata

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, el MCP-1 de rata recombinante (MN 555110) debe alicuotarse en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5 - 10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina humana o bovina, alicuotarse y almacenarse a -80 °C. Para el uso en ensayos biológicos in vitro, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 0,5 - 1 mg/mL. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5 - 10 mg/mL. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede producirse una pérdida de actividad. Las proteínas transportadoras deben examinarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a la toxicidad, los altos niveles de endotoxina o la posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: La MCP-1 recombinante de rata (MN 555110) puede ser útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína MCP-1 de rata mediante ELISA tipo sándwich con el anticuerpo C4 purificado (n.° de cat. 555072) como anticuerpo de captura y el anticuerpo B4 biotinilado (n.° de cat. 555074) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se recomienda a los investigadores utilizar diluciones dobles de MCP-1 recombinante de rata de 2000 a 5 pg/mL para cada placa ELISA. Para medir la MCP-1 de rata en suero o plasma, se recomienda encarecidamente a los investigadores utilizar el kit BD OptEIA™ Rat MCP-1 (n.° de cat. 555130). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de bioensayo no se analiza rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente titularlo e incluir los controles adecuados en los experimentos pertinentes. Se ha informado previamente de un rango de actividad que abarca una DE50 de 60 a 600 ng/ml utilizando THP-1 como células indicadoras mediante un ensayo de flujo de calcio. Control de bloqueo de ligando para la tinción inmunofluorescente de citocinas: La MCP-1 de rata recombinante puede utilizarse como control de bloqueo para demostrar la especificidad de la tinción de MCP-1 mediante el formato conjugado con PE (n.º de cat. 554443) del anticuerpo 2H5 anti-MCP-1 de rata. Se advierte a los investigadores que esta aplicación de bloqueo no se prueba de forma rutinaria para este material. El uso de controles de tinción para la tinción inmunofluorescente y el análisis citométrico de flujo de células productoras de citocinas se ha descrito previamente (Prussin et al.).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.