BD, 555554, BD Pharmingen™ PE-Cy™5 Anti-HLA-ABC humano de ratón

Nombre alternativo: Complejo mayor de histocompatibilidad, clase I, A, B, C; HLA clase IA, B, C
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_395937
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy5 (anteriormente conocido como BD Cy-Chrome™) en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy5 libre.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para conocer los espectros de fluorocromos y los ajustes adecuados del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. PE-Cy5 es un fluorocromo en tándem compuesto de R-ficoeritrina (PE), que se excita con la luz de 488 nm de un láser de iones de argón y sirve como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy5, que actúa como aceptor de energía y fluoresce a 670 nm. BD Biosciences Pharmingen ha maximizado la transferencia de energía del fluorocromo en PE-Cy5, maximizando así la intensidad de su emisión de fluorescencia, minimizando la emisión residual del PE y minimizando la variación entre lotes. PE-Cy5 está optimizado para su uso con un único láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem PE-Cy5, se debe tener especial cuidado al utilizar citómetros de doble láser que puedan excitar directamente tanto PE como Cy5™. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que se produce en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la iluminación ambiental. Se ha informado que los fluorocromos en tándem PE-Cy5 se unen a algunas clases de macrófagos y granulocitos humanos a través de receptores Fc, y que el PE se une a los linfocitos B murinos a través de receptores Fc. La preincubación de leucocitos murinos con el mAb 2.4G2 anti-CD16/CD32 murino purificado Mouse BD Fc Block™ puede reducir la unión inespecífica de los reactivos conjugados con PE-Cy5 a los linfocitos B murinos. Sin embargo, los reactivos conjugados con PE-Cy5 no deben utilizarse para teñir esplenocitos de ratones SJL, NOD y MRL, ya que se ha informado que los linfocitos B u otros leucocitos presentan una tinción inespecífica independientemente del uso de Mouse BD Fc Block™ (el complejo CD72c se ha relacionado con la unión de PE-Cy5 en estas cepas). Los reactivos conjugados con los fluorocromos en tándem PE, PerCP, PerCP-Cy5.5, APC y APC-Cy7 pueden utilizarse en leucocitos de estas cepas de ratones. Cy es una marca registrada de GE Healthcare. Es posible que la reactividad cruzada detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources.