BD, 555823, BD Pharmingen™ PE-Cy™5-Ratón anti-CD34 humano

Nombre alternativo: gp105-120; My10; Antígeno de células progenitoras hematopoyéticas CD34
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
Número de taller: V MA27, VI E004
ID de registro: AB_396152
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy5 (anteriormente conocido como BD Cy-Chrome™) en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy5 libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Las perlas BD™ CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar la dispersión de fluorescencia (compensación). Cuando los anticuerpos conjugados con fluorocromos se unen a las perlas CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos, puede haber pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de dispersión diferentes a los de los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, se compare la dispersión en las células y en las perlas CompBead para garantizar que las perlas BD Comp sean adecuadas para su aplicación celular específica.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso en el volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Para conocer los espectros de fluorocromos y los ajustes adecuados del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Observe las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; Por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la iluminación ambiental. PE-Cy5 está optimizado para usarse con un solo láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem PE-Cy5, se debe tener especial cuidado al usar citómetros de láser dual que pueden excitar directamente tanto PE como Cy5™. PE-Cy5 es un fluorocromo en tándem compuesto de R-ficoeritrina (PE), que se excita con la luz de 488 nm de un láser de iones de argón y sirve como donador de energía, acoplado al colorante de cianina Cy5, que actúa como aceptor de energía y fluoresce a 670 nm. BD Biosciences Pharmingen ha maximizado la transferencia de energía del fluorocromo en PE-Cy5, maximizando así la intensidad de su emisión de fluorescencia, minimizando la emisión residual de PE y minimizando la variación entre lotes. Se ha descrito que los fluorocromos en tándem de PE-Cy5 se unen a algunas clases de macrófagos y granulocitos humanos a través de receptores Fc, y que PE se une a los linfocitos B murinos a través de receptores Fc. La preincubación de leucocitos murinos con el mAb 2.4G2 anti-CD16/CD32 murino purificado Mouse BD Fc Block™ puede reducir la unión inespecífica de los reactivos conjugados con PE-Cy5 a los linfocitos B murinos. Sin embargo, los reactivos conjugados con PE-Cy5 no deben utilizarse para teñir esplenocitos de ratones SJL, NOD y MRL, ya que se ha descrito que los linfocitos B u otros leucocitos presentan una tinción inespecífica, independientemente del uso de Mouse BD Fc Block™ (el complejo CD72c se ha relacionado con la unión de PE-Cy5 en estas cepas). Los reactivos conjugados con PE, PerCP, PerCP-Cy5.5, APC y el fluorocromo en tándem APC-Cy7 pueden utilizarse en leucocitos de estas cepas de ratones. Cy es una marca registrada de GE Healthcare. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.