BD, 556889, BD Pharmingen™ PE-Cy™5 Ratón anti-CD195 humano

Nombre alternativo: CCR5; Receptor de quimiocina CC tipo 5; CC-CKR-5; CKR5; CHEMR13
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: Ratón C57BL/6 IgG2a, κ
Inmunógeno: Línea celular transfectada con CCR5 humano
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
Número de taller: VII 70307
ID del gen Entrez: 1234
ID de registro: AB_396529
Tampón de almacenamiento: solución tamponada acuosa que contiene BSA, estabilizador de proteínas y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy5 (anteriormente conocido como BD Cy-Chrome™) en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy5 libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Los estudios de inmunofenotipado de receptores de quimiocinas deben realizarse con sangre completa recién extraída (<24 h). La incubación con el anticuerpo debe realizarse a temperatura ambiente y en oscuridad. Se ha demostrado que la manipulación celular, como la separación con Ficoll-Paque™, la congelación o la exposición a bajas temperaturas antes de la tinción, causa una disminución de la intensidad de la tinción y resultados inconsistentes.
Avisos del producto: Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente utilizamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). PE-Cy5 está optimizado para su uso con un único láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem PE-Cy5, se debe tener especial cuidado al utilizar citómetros de doble láser que puedan excitar directamente tanto PE como Cy5™. Cy es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Este producto conjugado se vende bajo licencia de las siguientes patentes: Patentes de EE. UU. n.° 5.486.616; 5.569.587; 5.569.766; 5.627.027. PE-Cy5 es un fluorocromo en tándem compuesto de R-ficoeritrina (PE), que se excita con la luz de 488 nm de un láser de iones de argón y actúa como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy5, que actúa como aceptor de energía y fluoresce a 670 nm. BD Biosciences Pharmingen ha maximizado la transferencia de energía del fluorocromo en PE-Cy5, maximizando así la intensidad de su emisión de fluorescencia, minimizando la emisión residual de PE y la variación entre lotes. Este producto está sujeto a los derechos de propiedad de Amersham Biosciences Corp. y la Universidad Carnegie Mellon, y se fabrica y vende bajo licencia de Amersham Biosciences Corp. Este producto tiene licencia de venta exclusiva para investigación. No tiene licencia para ningún otro uso. Si necesita una licencia comercial para usar este producto y no la tiene, devuelva este material sin abrir a BD Biosciences, 10975 Torreyana Rd, San Diego, CA 92121 y se le reembolsará cualquier dinero pagado por el material. Para los espectros de fluorocromo y los ajustes adecuados del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Ficoll-Paque es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Observe las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; Por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la luz ambiental. Se ha descrito que los fluorocromos en tándem PE-Cy5 se unen a algunas clases de macrófagos y granulocitos humanos a través de receptores Fc, y que el PE se une a los linfocitos B murinos a través de receptores Fc. La preincubación de leucocitos murinos con el mAb 2.4G2 anti-CD16/CD32 murino purificado Mouse BD Fc Block™ puede reducir la unión inespecífica de los reactivos conjugados con PE-Cy5 a los linfocitos B murinos. Sin embargo, no se deben utilizar reactivos conjugados con PE-Cy5 para teñir esplenocitos de ratones SJL, NOD y MRL, ya que se ha descrito que los linfocitos B y otros leucocitos presentan una tinción inespecífica, independientemente del uso de Mouse BD Fc Block™ (el complejo CD72c se ha relacionado con la unión de PE-Cy5 en estas cepas). Los reactivos conjugados con PE, PerCP, PerCP-Cy5.5, APC y el fluorocromo en tándem APC-Cy7 pueden utilizarse en leucocitos de estas cepas de ratones. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources.