BD, 557643, BD Pharmingen™ PE-Cy™7 Anti-IFN-γ humano de ratón

Nombre alternativo: IFNG; Interferón gamma; Interferón-γ; interferón tipo II; MAF
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: proteína recombinante IFN-γ humana
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_396760
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy7 en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy7 libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo B27 conjugado con PE-Cy7 (n.° de cat. 557643) es útil para la tinción inmunofluorescente multicolor y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IFN-γ en poblaciones celulares mixtas. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es el siguiente: prebloquear las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo B27 no marcado (n.° de cat. 554699) antes de la tinción. La técnica de tinción de citocinas intracelulares y los controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Para conocer la metodología específica, visite la sección de protocolos en "Flujo intracelular" de nuestro sitio web: http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Neutralización: El anticuerpo NA/LE B27 (n.º de cat. 554698) es útil para neutralizar la bioactividad del IFN-γ humano. IP/WB: Se ha descrito su utilidad en estudios de inmunoprecipitación. Se ha descrito que el anticuerpo B27 no se une al IFN-γ desnaturalizado. Tenga en cuenta que estas aplicaciones no se prueban de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Avisos del producto Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Este reactivo ha sido prediluido para su uso en el volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. APC-Cy7 es un fluorocromo en tándem compuesto de aloficocianina (APC), que se excita mediante líneas láser entre 595 y 647 nm y sirve como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy7™, que actúa como aceptor de energía y fluoresce a 780 nm. BD Biosciences Pharmingen ha maximizado la transferencia de energía del fluorocromo en APC-Cy7, maximizando así la intensidad de su emisión de fluorescencia, minimizando la emisión residual de APC y minimizando la compensación electrónica requerida en sistemas de citometría de flujo multiláser-láser. Nota: Si bien se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la emisión residual de APC, se recomienda encarecidamente analizar cada lote para detectar diferencias en la compensación requerida y realizar controles de compensación individuales para cada conjugado de APC-Cy7. La emisión del fluorocromo en tándem de APC-Cy7 se recoge en un detector para longitudes de onda de fluorescencia de 750 nm y superiores. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que se produce en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, se recomienda tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la iluminación ambiental. Para conocer los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Advertencia: Algunos conjugados APC-Cy7 y PE-Cy7 muestran cambios en su espectro de emisión con la exposición prolongada al formaldehído. Si no puede analizar las muestras fijadas en cuatro horas, le recomendamos utilizar el fijador estabilizador BD™ (n.° de cat. 338036). Cy es una marca registrada de GE Healthcare. Es posible que la reactividad cruzada detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.