BD, 557645, Control de isotipo IgG1 κ de rata BD Pharmingen™ PE-Cy™7

Isotipo: IgG1 de rata, κ
Inmunógeno: inmunoglobulina de ratón
Aplicación: Citometría de flujo, control de isotipo (probado rutinariamente), neutralización (probado durante el desarrollo)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_396762
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy7 en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y la PE-Cy7 libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente para citocinas intracelulares: La inmunoglobulina R3-34 conjugada con PE-Cy7 (n.º de cat. 557645) es un control de isotipo κ de IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón o humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina para el análisis de citometría de flujo. Úselo en concentraciones comparables al anticuerpo de interés. La técnica de tinción de citocinas intracelulares y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Para conocer la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y vaya a la sección de protocolos o al capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de función inmunitaria. R3-34 es adecuado como control de isotipo para anticuerpos neutralizantes de IgG1 de rata. Cat. No. 554682, Se recomienda una formulación sin azida y con bajo contenido de endotoxinas para ensayos de neutralización.
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. PE-Cy7 es un fluorocromo en tándem compuesto de R-ficoeritrina (PE), que se excita con luz de 488 nm y sirve como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy7, que actúa como aceptor de energía y fluoresce máximamente a 780 nm. La emisión del fluorocromo en tándem PE-Cy7 se recoge en un detector para longitudes de onda de fluorescencia de 750 nm y superiores. Aunque se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, se pueden observar diferencias en la emisión residual de PE. Por lo tanto, recomendamos que se realicen controles de compensación individuales para cada conjugado PE-Cy7. El PE-Cy7 está optimizado para su uso con un único láser de iones de argón que emite luz de 488 nm, y no existe una superposición significativa entre los espectros de emisión del PE-Cy7 y el FITC. Al utilizar citómetros de doble láser, que pueden excitar directamente tanto el PE como el Cy7, recomendamos utilizar la compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o la compensación por software durante el análisis de datos. Advertencia: Algunos conjugados de APC-Cy7 y PE-Cy7 muestran cambios en su espectro de emisión con la exposición prolongada al formaldehído. Si no puede analizar las muestras fijadas en un plazo de cuatro horas, le recomendamos utilizar el fijador estabilizador BD™ (n.º de cat. 338036). Para obtener información sobre los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Cy es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Este producto conjugado se vende bajo licencia de las siguientes patentes: Patentes estadounidenses n.° 5,486,616; 5,569,587; 5,569,766; 5,627,027. Este producto está sujeto a los derechos de propiedad de Amersham Biosciences Corp. y la Universidad Carnegie Mellon, y se fabrica y vende bajo licencia de Amersham Biosciences Corp. Este producto tiene licencia de venta únicamente para investigación. No está autorizado para ningún otro uso. Si necesita una licencia comercial para usar este producto y no la tiene, devuelva este material, sin abrir, a BD Biosciences, 10975 Torreyana Rd, San Diego, CA 92121 y se le reembolsará el importe pagado por el material.