BD, 557649, BD Pharmingen™ PE-Cy™7 Rata Anti-IFN-γ de Ratón

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata, κ
Inmunógeno: proteína recombinante IFN-γ de ratón
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_396766
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy7 en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y la PE-Cy7 libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo XMG1.2 conjugado con PE-Cy-7 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IFN-γ dentro de poblaciones celulares mixtas. Para una tinción inmunofluorescente óptima con análisis de citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,125 µg mAb/millón de células). Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con anticuerpo XMG1.2 sin marcar (n.º de cat. 554409) antes de la tinción. Un control de isotipo IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas o de ratón fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es la inmunoglobulina PE-R3-34 (n.º de cat. 557645); utilizar en concentraciones comparables al anticuerpo de interés.
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Advertencia: Algunos conjugados APC-Cy7 y PE-Cy7 muestran cambios en su espectro de emisión con la exposición prolongada al formaldehído. Si no puede analizar las muestras fijadas en cuatro horas, le recomendamos que utilice el fijador estabilizador BD™ (n.º de cat. 338036). Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que se produce en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con esos reactivos, a la iluminación ambiental. PE-Cy7 es un fluorocromo en tándem compuesto por R-ficoeritrina (PE), que se excita con luz de 488 nm y actúa como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy7, que actúa como aceptor de energía y presenta una fluorescencia máxima de 780 nm. La emisión del fluorocromo en tándem PE-Cy7 se capta en un detector para longitudes de onda de fluorescencia de 750 nm y superiores. Si bien se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, pueden observarse diferencias en la emisión residual de PE. Por lo tanto, recomendamos realizar controles de compensación individuales para cada conjugado de PE-Cy7. PE-Cy7 está optimizado para su uso con un único láser de iones de argón que emite luz de 488 nm, y no existe una superposición significativa entre los espectros de emisión de PE-Cy7 y FITC. Al utilizar citómetros de doble láser, que pueden excitar directamente tanto el PE como el Cy7, recomendamos usar la compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o la compensación por software durante el análisis de datos. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Cy es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Este producto conjugado se vende bajo licencia de las siguientes patentes: Patentes estadounidenses n.° 5.486.616; 5.569.587; 5.569.766; 5.627.027. Este producto está sujeto a los derechos de propiedad de Amersham Biosciences Corp. y la Universidad Carnegie Mellon, y se fabrica y vende bajo licencia de Amersham Biosciences Corp. Este producto tiene licencia de venta únicamente para investigación. No está autorizado para ningún otro uso. Si necesita una licencia comercial para usar este producto y no la tiene, devuelva este material sin abrir a BD Biosciences, 10975 Torreyana Rd, San Diego, CA 92121, y se le reembolsará el importe pagado por el material.