BD, 557718, BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 488 Anti-IFN-γ humano de ratón

Nombre alternativo: IFNG; Interferón gamma; Interferón-γ; interferón tipo II; MAF
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: proteína recombinante IFN-γ humana
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_396827
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con Alexa Fluor® 488 en condiciones óptimas y se eliminó el Alexa Fluor® 488 que no reaccionó.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo B27 conjugado con FITC, PE, APC, PE-Cy7, Alexa Fluor® 647 y Alexa Fluor® 488 (n.º de cat. 554700, 554701, 554702, 557643, 557729 y 557718) es útil para la tinción inmunofluorescente multicolor y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IFN-γ en poblaciones celulares mixtas. Para una tinción inmunofluorescente óptima, este anticuerpo (n.º de cat. 557718) debe utilizarse a una dosis de 5 µl por prueba. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es el siguiente: prebloquear las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo B27 no marcado (n.° de cat. 554699) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular de citocinas y los controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es Alexa Fluor® 488-MOPC-21 (n.° de cat. 557721); usar a una dosis de 5 µl/prueba. Se producirán variaciones entre donantes, lo cual debe tenerse en cuenta al analizar la expresión de citocinas. Para obtener información sobre la metodología específica y la tinción intracelular, consulte los protocolos en la sección "Flujo intracelular" de nuestro sitio web: http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Neutralización: El anticuerpo NA/LE™ B27 (n.° de cat. 554698) es útil para neutralizar la bioactividad del IFN-γ humano. Un control de isotipo IgG1 de ratón NA/LE™ adecuado para el anticuerpo NA/LE B27 es el anticuerpo 107.3 (n.° de cat. 554721). IP/WB: Se ha descrito la utilidad del anticuerpo B27 conjugado con PE en estudios de inmunoprecipitación. Se ha descrito que el anticuerpo B27 no se une al IFN-γ desnaturalizado. Tenga en cuenta que este anticuerpo no se analiza de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para espectros de fluorocromos y configuraciones adecuadas del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. La emisión de fluorocromo Alexa Fluor® 488 se recolecta con la misma configuración del instrumento que para el isotiocianato de fluoresceína (FITC). Los conjugados de anticuerpos Alexa Fluor®, Pacific Blue™ y Cascade Blue® presentes en este producto se venden bajo licencia de Molecular Probes, Inc. exclusivamente para uso en investigación, excluyendo su uso en combinación con microarrays o como reactivos específicos para analitos. Los colorantes Alexa Fluor® (excepto Alexa Fluor® 430), Pacific Blue™ y Cascade Blue® están protegidos por patentes en trámite y emitidas. Alexa Fluor® es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR. Es posible que la reactividad cruzada detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.