BD, 557719, BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 488 Rata Anti-TNF de Ratón

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: TNF de ratón recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_396828
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con Alexa Fluor® 488 en condiciones óptimas y se eliminó el Alexa Fluor® 488 no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: El anticuerpo MP6-XT22 conjugado con Alexa Fluor® 488 (n.° de cat. 557719) está disponible para tinción inmunofluorescente multicolor y análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de TNF en poblaciones celulares mixtas (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente óptima con análisis por citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para conocer la metodología específica, consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular para análisis por citometría de flujo en el Manual de Función Inmunitaria, ambos disponibles en nuestro sitio web: www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo MP6-XT22 conjugado con un exceso molar de ligando (p. ej., TNF murino recombinante; n.º de cat. 554589) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo MP6-XT22 no marcado (n.º de cat. 554417) antes de la tinción. La técnica de tinción y los controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón y humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es Alexa Fluor® 488 conjugado R3-34 (n.º de cat. 557720); utilizar en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg mAb/1 millón de células).
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para obtener los protocolos técnicos. Para los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La emisión de fluorocromo Alexa Fluor® 488 se recoge en la misma configuración del instrumento que para el isotiocianato de fluoresceína (FITC). Los conjugados de anticuerpos de colorante Alexa Fluor®, Pacific Blue™ y Cascade Blue® en este producto se venden bajo licencia de Molecular Probes, Inc. solo para uso en investigación, excluyendo el uso en combinación con microarrays o como reactivos específicos de analito. Los colorantes Alexa Fluor® (excepto Alexa Fluor® 430), el colorante Pacific Blue™ y el colorante Cascade Blue® están protegidos por patentes en trámite y emitidas. Alexa Fluor® es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR.