Product Description
Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG2b de rata
Inmunógeno: proteína recombinante IL-2 de ratón
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_396833
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con Alexa Fluor® 488 en condiciones óptimas y se eliminó el Alexa Fluor® 488 no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente para análisis de citometría de flujo: El anticuerpo JES6-5H4 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-2 en poblaciones celulares mixtas. El anticuerpo conjugado con Alexa Fluor® 488 (n.° de cat. 557725) es especialmente adecuado para estos estudios. Para una tinción inmunofluorescente óptima para el análisis de citometría de flujo, se debe titular el anticuerpo anticitocina. Para conocer la metodología específica, consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción inmunofluorescente intracelular en el Manual de Función Inmunitaria, ambos disponibles en nuestro sitio web: www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo JES6-5H4 conjugado con PE con un ligando (p. ej., IL-2 recombinante de ratón, n.º de cat. 550069) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo JES6-5H4 no marcado (n.º de cat. 554425) antes de la tinción. La técnica de tinción y los controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo IgG2b de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es Alexa Fluor® 488-A95-1 (n.º de cat. 557726); úselo en concentraciones comparables a las del anticuerpo de interés. Para conocer la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y vaya a la sección de protocolos o al capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de función inmunitaria.
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para obtener los protocolos técnicos. Para los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La emisión de fluorocromo Alexa Fluor® 488 se recoge en la misma configuración del instrumento que para el isotiocianato de fluoresceína (FITC). Los conjugados de anticuerpos de colorante Alexa Fluor®, Pacific Blue™ y Cascade Blue® en este producto se venden bajo licencia de Molecular Probes, Inc. solo para uso en investigación, excluyendo el uso en combinación con microarrays o como reactivos específicos de analito. Los colorantes Alexa Fluor® (excepto Alexa Fluor® 430), el colorante Pacific Blue™ y el colorante Cascade Blue® están protegidos por patentes en trámite y concedidas. El uso de estos productos para medir antígenos de activación expresados en subgrupos de células mononucleares con el fin de monitorizar el estado inmunorregulador puede estar amparado por una o más reivindicaciones de las siguientes patentes: Patentes estadounidenses n.º 5.445.939, 5.656.446 y 5.843.689; Patente europea n.º 319.543; Patente canadiense n.º 1.296.622; Patente australiana n.º 615.880; y Patente japonesa n.º 2.769.156. Alexa Fluor® es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR.
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