BD, 557729, BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 647 Anti-IFN-γ humano de ratón

Nombre alternativo: IFNG; Interferón gamma; Interferón-γ; interferón tipo II; MAF
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: proteína recombinante IFN-γ humana
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_396837
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con Alexa Fluor® 647 en condiciones óptimas y se eliminó el Alexa Fluor® 647 no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: Los anticuerpos B27 conjugados con FITC, PE, APC, PE-Cy7, Alexa Fluor® 488 y Alexa Fluor® 647 (n.º de cat. 554700, 554701, 554702, 557643, 557718 y 557729) son útiles para la tinción inmunofluorescente multicolor y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IFN-γ dentro de poblaciones celulares mixtas. Para una tinción inmunofluorescente óptima, este anticuerpo debe usarse a 5 µl por prueba. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es el siguiente: prebloquee las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo B27 sin marcar (n.º de cat. 554699) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular de citocinas y los controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es Alexa Fluor® 647-MOPC-21 (n.º de cat. 557732); usar a 5 µl/prueba. Neutralización: El anticuerpo NA/LE™ B27 (n.º de cat. 554698) es útil para la neutralización de la bioactividad del IFN-γ humano. Un control de isotipo de IgG1 de ratón NA/LE adecuado para coincidir con el anticuerpo NA/LE B27 es el anticuerpo 107.3 (n.º de cat. 554721). IP/WB: Se ha informado que el anticuerpo B27 no conjugado es útil para estudios de inmunoprecipitación. Se ha informado que el anticuerpo B27 no se une al IFN-γ desnaturalizado. Tenga en cuenta que esta aplicación no se prueba de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La emisión del fluorocromo Alexa Fluor® 647 se recolecta con la misma configuración del instrumento que para la aloficocianina (APC). Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Los conjugados de anticuerpos Alexa Fluor®, Pacific Blue™ y Cascade Blue® presentes en este producto se venden bajo licencia de Molecular Probes, Inc. exclusivamente para uso en investigación, excluyendo su uso en combinación con microarrays o como reactivos específicos para analitos. Los colorantes Alexa Fluor® (excepto Alexa Fluor® 430), Pacific Blue™ y Cascade Blue® están protegidos por patentes en trámite y emitidas. Alexa Fluor® es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR. Es posible que la reactividad cruzada detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.