BD, 558052, Tampón de permanente BD Phosflow™ II

Preparación y almacenamiento: Preparación y almacenamiento Conservar sin diluir a temperatura ambiente.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Citometría de flujo: 1. Caliente el tampón fijador BD Phosflow™ I (n.º de cat. 557870) a 37 °C antes de usarlo. 2. Enfríe el tampón de permeación BD Phosflow™ II a -20 °C antes de usarlo. 3. Recoja las PBMC después de la separación con Ficoll-Paque y trátelas con los activadores celulares adecuados, según corresponda. 4. Al finalizar el tratamiento, mezcle inmediatamente un volumen del tampón fijador BD Phosflow™ I caliente con un volumen de la suspensión de PBMC. Mezcle bien e incube los tubos en un baño de agua a 37 °C durante 10 min. Centrifugue las células a 250 xg durante 10 min en una centrífuga de sobremesa y luego aspire el sobrenadante. 5. Lave las células una vez con tampón de tinción BD Pharmingen™ (FBS) (n.° de cat. 554656). Como alternativa, puede usar solución de lavado/tinción 1X (1 x PBS, 1 % FCS y 0,09 % de azida sódica). Centrifugue para sedimentar las células y eliminar el sobrenadante. 6. Agite en vórtex para desprendimiento de las células. Permeabilice las células añadiendo lentamente BD Phosflow™ Perm Buffer II frío mientras agita en vórtex. Incube en hielo durante 30 min y luego centrifugue las células. 7. Lave las células dos veces con 5-10 ml de tampón de tinción BD Pharmingen™ (FBS). Centrifugue a 250 xg durante 10 minutos y elimine el sobrenadante por aspiración. 8. Resuspenda las células en BD Pharmingen™ Stain Buffer (FBS) a 1x 10^7/ml y alícuota 100 µl en cada tubo de flujo para continuar con la tinción de anticuerpos y el análisis de citometría de flujo. Peligro: BD Phosflow™ Perm Buffer II contiene 64,86 % de metanol (p/p). Indicaciones de peligro Líquido y vapores altamente inflamables. Tóxico en caso de ingestión, contacto con la piel o inhalación. Provoca daños en los órganos. Consejos de precaución Mantener alejado del calor, chispas, llamas abiertas, superficies calientes y fuentes de ignición. - No fumar. Mantener el recipiente herméticamente cerrado. Conecte a tierra y ensamble el recipiente y el equipo de recepción. Utilizar equipo [eléctrico/de ventilación/de iluminación/] a prueba de explosiones. Utilizar herramientas que no produzcan chispas. Adoptar medidas para evitar descargas estáticas. Utilizar ropa/protección ocular/guantes de protección. No respirar la niebla/los vapores/el aerosol. Utilizar únicamente en exteriores o en un área bien ventilada. Lávese bien después de manipular. No coma, beba ni fume mientras utiliza este producto. EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el cabello): Quítese inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuáguese la piel con agua o dúchese. Quítese inmediatamente toda la ropa contaminada. Lave la ropa contaminada antes de volver a usarla. EN CASO DE INHALACIÓN: Lleve a la víctima al aire libre y manténgala en reposo en una posición confortable para respirar. EN CASO DE INGESTIÓN: Llame inmediatamente a un CENTRO DE TOXICOLOGÍA/médico. Enjuáguese la boca. Llame a un CENTRO DE TOXICOLOGÍA/médico. En caso de exposición: Llame a un centro de toxicología/médico. Almacenar en un lugar bien ventilado. Mantener fresco. Almacenar bajo llave. Mantener el recipiente herméticamente cerrado. El líquido inflamable que acumula estática puede cargarse electrostáticamente incluso en equipos conectados a tierra. Las chispas pueden encender el líquido y el vapor. Puede causar un incendio repentino o una explosión. Utilice medios de extinción adecuados para extinguir.
Avisos del producto: Ficoll-Paque es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Alexa Fluor® es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.