BD, 558331, cóctel de anticuerpos de subconjunto de linfocitos B de ratón BD Pharmingen™, con control de isotipo; PE-Cy™7 CD45R/B220, PE CD23 (FcεRII) y FITC sIgM

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Estado regulatorio: RUO
ID de registro: AB_397075
Descripción: Descripción El cóctel de anticuerpos del subconjunto de linfocitos B de ratón es un reactivo de tres colores diseñado para identificar los principales subconjuntos de linfocitos B mediante tinción inmunofluorescente directa con análisis de citometría de flujo. El anticuerpo RA3-6B2 reconoce un epítopo del dominio extracelular de CD45 que se expresa principalmente, a niveles regulados por el desarrollo, en linfocitos B en todas las etapas, desde pro-B hasta células B maduras, activadas, secretoras de anticuerpos y de memoria. Aunque CD45R/B220 se ha considerado un antígeno definitorio del linaje de células B, se ha informado que las células NK líticamente activas, algunas células T activadas o apoptóticas y algunos progenitores hematopoyéticos que no son de linaje B expresan CD45R/B220. El anticuerpo B3B4 reconoce CD23, el receptor Fc de IgE de baja afinidad que se expresa en células B convencionales maduras en reposo, pero no en células B-1 (linfocitos B CD5+), linfocitos T o mastocitos. El anticuerpo II/41 reconoce la IgM de superficie (sIgM), específicamente la cadena de inmunoglobulina, que es un componente del complejo receptor de antígeno en linfocitos B inmaduros y maduros, incluyendo células plasmáticas. Los tres anticuerpos han sido titulados y prediluidos, mezclados y formulados para un rendimiento óptimo de tinción. El Control de Isotipo del Subconjunto de Linfocito B de Ratón contiene concentraciones equivalentes de inmunoglobulina de control negativo con fluorocromo e isotipo coincidentes. El uso de tres fluorocromos diferentes para el marcaje de los tres anticuerpos permite el reconocimiento de cada uno de los tres antígenos en cada célula de una muestra. Los niveles de expresión de los tres antígenos distinguen las principales subpoblaciones de linfocitos B en desarrollo y periféricos. Se pueden combinar reactivos adicionales marcados con fluorocromo con el Cóctel de Anticuerpos del Subconjunto de Linfocito B de Ratón para caracterizar con más detalle las subpoblaciones de células B.
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy7 en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy7 libre. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE libre. El anticuerpo se conjugó con FITC en condiciones óptimas, eliminándose el FITC no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Para los espectros de fluorocromo y los ajustes adecuados del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. PE-Cy7 es un fluorocromo en tándem compuesto de R-ficoeritrina (PE), que se excita con luz de 488 nm y sirve como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy7, que actúa como aceptor de energía y fluoresce máximamente a 780 nm. La emisión del fluorocromo en tándem PE-Cy7 se recoge en un detector para longitudes de onda de fluorescencia de 750 nm y superiores. Aunque se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, pueden observarse diferencias en la emisión residual de PE. Por lo tanto, recomendamos realizar controles de compensación individuales para cada conjugado PE-Cy7. PE-Cy7 está optimizado para su uso con un único láser de iones de argón que emite luz de 488 nm, y no existe una superposición significativa entre los espectros de emisión de PE-Cy7 y FITC. Al utilizar citómetros de doble láser, que pueden excitar directamente tanto PE como Cy7, recomendamos el uso de compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o compensación de software durante el análisis de datos. Advertencia: Algunos conjugados APC-Cy7 y PE-Cy7 muestran cambios en su espectro de emisión con la exposición prolongada al formaldehído. Si no puede analizar las muestras fijadas en un plazo de cuatro horas, le recomendamos que utilice el fijador estabilizador BD™ (n.º de cat. 338036). Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la iluminación ambiental. Este producto está sujeto a los derechos de propiedad de Amersham Biosciences Corp. y Carnegie Mellon University, y se fabrica y vende bajo licencia de Amersham Biosciences Corp. Este producto tiene licencia de venta solo para investigación. No tiene licencia para ningún otro uso. Si necesita una licencia comercial para usar este producto y no la tiene, devuelva este material, sin abrir, a BD Biosciences, 10975 Torreyana Rd, San Diego, CA 92121 y se le reembolsará cualquier dinero pagado por el material. Cy es una marca comercial de Amersham Biosciences Limited. Este producto conjugado se vende bajo licencia de las siguientes patentes: Patentes de EE. UU. n.º 5.486.616; 5.569.587; 5.569.766; 5.627.027. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.
Descripción: Cantidad/Tamaño: Número de pieza: ID de EntrezGene
N/D : 100.0 : N/D : N/D