BD, 559321, BD Pharmingen™ PE Ratón Anti-TNF Humano

Nombre alternativo: Factor de necrosis tumoral alfa; TNF-a; TNF-α; TNFSF2; caquectina
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: TNF humano recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_397219
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo MAb11 conjugado con PE es útil para la tinción inmunofluorescente intracelular y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de TNF en poblaciones celulares mixtas (véase la figura). Esta formulación de 100 muestras del anticuerpo MAb11 conjugado con PE ha sido pretitulada para asegurar una detección intracelular eficaz del TNF humano utilizando 20 µl/1 x 10^6 células. La técnica de tinción y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Para conocer la metodología específica, visite la sección de protocolos "Citocinas (tinción intracelular)" y "Flujo intracelular" en nuestro sitio web: http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Nota importante: Esta solución de anticuerpo pretitulada no contiene ningún agente de permeabilización celular. Es necesario incluir un agente de permeabilización celular al utilizar la solución de anticuerpos pretitulados para teñir células fijadas y permeabilizadas. El tampón Perm/Wash™ (n.° de cat. 554723) contiene saponina, agente de permeabilización, y es útil para este propósito, como se describe en la sección de USO a continuación. USO 1. Resuspender 1 x 10^6 células fijadas y permeabilizadas en 20 µl de la solución de anticuerpos pretitulados y 30 µl de tampón Perm/Wash™ 1X (n.° de cat. 554723). 2. Incubar la suspensión celular durante 15 minutos (a temperatura ambiente o 4 °C). 3. Lavar dos veces con 100 µl de tampón Perm/Wash™ 1X (n.° de cat. 554723).
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Es posible que la reactividad cruzada de especies detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos.