BD, 559325, BD Pharmingen™ PE Rata Anti-IL-12 p70 Humana

Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata, κ
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_397222
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis citométrico de flujo: El anticuerpo 20C2 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis citométrico de flujo de poblaciones celulares mixtas para identificar y enumerar células productoras de IL-12 p70. Esta formulación de 100 muestras del anticuerpo 20C2 conjugado con PE ha sido pretitulada para asegurar una detección intracelular eficaz de IL-12 p70 humana utilizando 20 µl/1 x 10^6 células. Un control de isotipo de IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo asociada al fluorocromo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina también está disponible en una formulación de 100 muestras de inmunoglobulina PE-R3-34 (n.º de cat. 559318). Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo 20C2 conjugado con fluorocromo con un exceso de ligando (p. ej., IL-12 p70 humana recombinante, n.º de cat. 554613) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo 20C2 sin marcar (n.º de cat. 557018) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Nota importante: Esta solución de anticuerpo pretitulado no contiene un agente de permeabilización celular. Es necesario incluir un agente de permeabilización celular cuando se utiliza la solución de anticuerpo pretitulado para teñir células fijadas y permeabilizadas. El tampón Perm/Wash™ (n.º de cat. 554723) contiene el agente de permeabilización saponina y es útil para este propósito.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Para obtener espectros de fluorocromo y configuraciones adecuadas del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos.