BD, 559328, BD Pharmingen™ PE Anti-IL-13 humana para ratas

Nombre alternativo: Interleucina-13; NC30; ALRH; BHR1; P600
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: IL-13 recombinante humana
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_397225
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis por citometría de flujo: El anticuerpo JES10-5A2 conjugado con PE puede utilizarse para la tinción inmunofluorescente multicolor y el análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-13 en poblaciones celulares mixtas (véase la figura). Esta formulación de 100 muestras del anticuerpo JES10-5A2 conjugado con PE ha sido pretitulada para asegurar la detección intracelular eficaz de IL-13 humana utilizando 20 µl/1 x 10^6 células. Para consultar la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo PE-JES10-5A2 con ligando (p. ej., IL-13 humana) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo JES10-5A2 no marcado (p. ej., Cat. No. 554570) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Una inmunoglobulina de control de isotipo IgG1 de rata adecuada para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas o de ratón fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina también está disponible en una formulación de 100 Test Size de anticuerpo PE-R3-34 (Cat. No. 559318). Nota importante: Esta solución de anticuerpo pretitulada no contiene un agente de permeabilización celular. Es necesario incluir un agente de permeabilización celular al utilizar la solución de anticuerpos pretitulados para teñir células fijadas y permeabilizadas. El tampón Perm/Wash™ (n.° de cat. 554723) contiene saponina, agente de permeabilización, y es útil para este propósito, como se describe en la sección de Usos a continuación. Uso: 1. Resuspender 1 x 10/^6 células fijadas y permeabilizadas en 20 µl de la solución de anticuerpos pretitulados y 30 µl de tampón Perm/Wash™ 1X (n.° de cat. 554723). 2. Incubar la suspensión celular durante 15 minutos (a temperatura ambiente o 4 °C). 3. Lavar dos veces con 100 µl de tampón Perm/Wash™ 1X (n.° de cat. 554723).
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Para los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés.