BD, 559498, BD Pharmingen™ FITC Ratón Anti-Rata IFN-γ

Reactividad: Rata (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: IFN-γ de rata recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_397253
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con FITC en condiciones óptimas y se eliminó el FITC no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis citométrico de flujo: El anticuerpo DB-1 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis citométrico de flujo para identificar y enumerar células productoras de IFN-γ dentro de poblaciones celulares mixtas. Esta formulación de tamaño de prueba 100 del anticuerpo DB-1 conjugado con FITC ha sido pretitulada para asegurar la detección intracelular efectiva de IFN-γ de rata utilizando 20 µl/1 x 10^6 células en un volumen final de 100 µl. Para la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y vaya a la sección de protocolos o al capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de Función Inmunitaria. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo DB-1 no marcado antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo han sido descritos en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. También está disponible un control de isotipo de IgG1 de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de rata fijadas con paraformaldehído y permeabilizadas con saponina: FITC-MOPC-21 (n.° de cat. 554679). Nota importante: Esta solución de anticuerpos pretitulados no contiene agente de permeabilización celular. Es necesario incluir un agente de permeabilización celular al utilizar la solución de anticuerpos pretitulados para teñir células fijadas y permeabilizadas. El tampón Perm/Wash™ (n.° de cat. 554723) contiene saponina, agente de permeabilización, y es útil para este propósito, como se describe a continuación. Resuspenda un millón de células fijadas y permeabilizadas en 20 µl de la solución de anticuerpos pretitulados y 30 µl de tampón Perm/Wash™ 1X (n.° de cat. 554723). Incubar la suspensión celular durante 15 minutos (a temperatura ambiente o 4 °C). Lavar dos veces con 100 µl de tampón Perm/Wash™ 1X (n.° de cat. 554723).
Avisos del producto: Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente utilizamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.