BD, 559499, BD Pharmingen™ PE Ratón Anti-Rata IFN-γ

Reactividad: Rata (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: IFN-γ de rata recombinante
Aplicación: Citometría de flujo/bloqueo intracelular (probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_397254
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo DB-1 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IFN-γ dentro de poblaciones de células mixtas. Esta formulación de tamaño de prueba 100 del anticuerpo DB-1 conjugado con PE ha sido pretitulada para asegurar una detección intracelular efectiva de IFN-γ de rata usando 20 µl/millón de células. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo han sido descritos en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Para una metodología específica, visite la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de función inmunitaria, ambos publicados en nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com. Un isotipo IgG1, κ de ratón adecuado también está disponible en una formulación de tamaño de prueba 100 PE-MOPC-21 (N.º de cat. 559320). Nota importante: Esta solución de anticuerpos pretitulados no contiene agente de permeabilización celular. Es necesario incluir un agente de permeabilización celular al utilizarla para teñir células fijadas y permeabilizadas. El tampón Perm/Wash™ (n.° de cat. 554723) contiene saponina, agente de permeabilización, y es útil para este propósito, como se describe a continuación. 1. Resuspenda 1 x 10^6 células fijadas y permeabilizadas en 20 µl de la solución de anticuerpos pretitulados y 30 µl de tampón Perm/Wash™ 1X (n.° de cat. 554723). 2. Incube la suspensión celular durante 15 minutos (a temperatura ambiente o a 4 °C). 3. Lave dos veces con 100 µl de tampón Perm/Wash™ 1X (n.° de cat. 554723).
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Para los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para obtener protocolos técnicos.