BD, 559560, BD Pharmingen™ Anti-CD196 humano purificado de ratón (CCR6)

Nombre alternativo: BN-1; CC CKR-6; Receptor de quimiocina CC tipo 6; CC-CKR-6; CCR-6
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: péptido CD196/CCR6 humano
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Concentración: 0,5 mg/ml
Número de taller: IX 48
ID de registro: AB_2291135
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados El anticuerpo 11A9 purificado (n.º de cat. 559560) se puede utilizar para la tinción inmunofluorescente y los análisis de citometría de flujo de leucocitos humanos (véase la imagen) y líneas celulares que expresan CCR6. Se recomienda un procedimiento de tinción de varios pasos para amplificar las señales inmunofluorescentes para el análisis de citometría de flujo de la expresión de CCR6 humano: Paso 1: Incubar las células con 0,1 - 1 µg de anticuerpo 11A9 purificado a 4 °C durante 15-20 minutos. Lavar las células dos veces con medio de tinción que contenga azida sódica (p. ej., PBS de Dulbecco o medio de cultivo tisular [sin rojo fenol ni biotina] con 0,09 % de azida sódica y 2 % de FCS inactivado por calor o 0,2 % de BSA). Paso 2: Incubar las células con 0,25 µg de Ig de cabra antirratón biotinilada (n.° de cat. 553999) a 4 °C durante 20 minutos. Lavar las células dos veces. Paso 3: Incubar las células con ≤ 0,06 mg de estreptavidina-ficoeritrina (n.° de cat. 554061) a 4 °C durante 20 minutos. Lavar dos veces. Resuspender las células en el medio de tinción y analizar las células teñidas con un citómetro de flujo BD FACScan™ (BD Biosciences, San José, CA) utilizando los controles de especificidad y compensación adecuados.
Avisos del producto: Avisos del producto. Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La azida sódica es un inhibidor reversible del metabolismo oxidativo; por lo tanto, las preparaciones de anticuerpos que contienen este agente conservante no deben utilizarse en cultivos celulares ni inyectarse en animales. La azida sódica puede eliminarse lavando las células teñidas o el anticuerpo unido a la placa, o dializando el anticuerpo soluble en un tampón sin azida sódica. Dado que la endotoxina también puede afectar los resultados de los estudios funcionales, recomendamos el formato de anticuerpo NA/LE (sin azida/bajo endotoxina), si está disponible, para uso in vitro e in vivo. Es posible que la reactividad cruzada de especies detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos.