BD, 560073, BD Pharmingen™ Anti-SSEA-4 de ratón purificado

Nombre alternativo: Antígeno embrionario específico de estadio 4
Reactividad: Humana (prueba de control de calidad), Ratón (reportada)
Isotipo: Ratón BALB/c IgG3, κ
Inmunógeno: Línea celular de teratocarcinoma humano
Aplicación: Bioimagen (probada rutinariamente), Western blot (probado durante el desarrollo), citometría de flujo (reportada)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_1645601
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene estabilizador de proteínas y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados 1. Siembre las células en un medio de cultivo adecuado a una densidad celular apropiada en una placa de imágenes BD Falcon™ de 96 pocillos (n.º de cat. 353219) y cultive durante la noche a 48 horas. 2. Retire el medio de cultivo de los pocillos, lave los pocillos dos veces con 100 μl de PBS 1× y fije las células añadiendo 100 µl de formaldehído fresco al 3,7 % en PBS o tampón de fijación BD Cytofix™ (n.º de cat. 554655) a cada pocillo e incubándolo durante 10 minutos a temperatura ambiente (TA). 3. Retire el fijador de los pocillos y lave los pocillos dos veces con 100 μl de PBS 1×. 4. Diluya el anticuerpo en PBS 1× y tiña las células añadiendo 50 µl del anticuerpo diluido a cada pocillo e incubándolo durante 1 hora a temperatura ambiente. 5. Retire el anticuerpo diluido y lave los pocillos tres veces con 100 µl de PBS 1×. 6. Retire el PBS, diluya el reactivo de segundo paso en PBS 1× y tiña las células añadiendo 50 µl del reactivo de segundo paso diluido a cada pocillo e incubándolo durante 1 hora a temperatura ambiente. 7. Retire el reactivo de segundo paso diluido y lave los pocillos dos veces con 100 µl de PBS 1×. 8. Retire el PBS y contrateñir los núcleos añadiendo 100 μl de una solución de 2 μg/ml de Hoechst 33342 (p. ej., Sigma-Aldrich Cat. No. B2261) en 1× PBS a cada pocillo al menos 15 minutos antes de la obtención de la imagen. 9. Observe y analice las células en un instrumento de obtención de imágenes adecuado.
Avisos del producto: Avisos del producto Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Este anticuerpo ha sido desarrollado y certificado para la aplicación de bioimagen. Sin embargo, no se realiza una prueba de bioimagen de rutina en cada lote. Se recomienda a los investigadores que titule el reactivo para un rendimiento óptimo. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La azida sódica es un inhibidor reversible del metabolismo oxidativo; por lo tanto, las preparaciones de anticuerpos que contienen este agente conservante no deben usarse en cultivos celulares ni inyectarse en animales. La azida sódica puede eliminarse lavando las células teñidas o el anticuerpo unido a la placa o dializando el anticuerpo soluble en un tampón sin azida sódica. Dado que la endotoxina también puede afectar los resultados de los estudios funcionales, recomendamos el formato de anticuerpo NA/LE (sin azida/bajo en endotoxina), si está disponible, para uso in vitro e in vivo. Para consultar las patentes estadounidenses aplicables, consulte bd.com/patents.