BD, 560173, BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 488 Antigeno TRA-1-60 humano de ratón

Nombre alternativo: TRA-1-60(R)
Reactividad: Humana (Prueba de control de calidad), Rh (Reportada)
Isotipo: IgM BALB/c de ratón, κ
Inmunógeno: Línea celular de carcinoma embrionario humano
Aplicación: Bioimagen (Probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_1645379
Tampón de almacenamiento: solución tamponada acuosa que contiene BSA, estabilizador de proteínas y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con Alexa Fluor® 488 en condiciones óptimas y se eliminó el Alexa Fluor® 488 que no reaccionó.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados 1. Siembre las células en un medio de cultivo adecuado a una densidad celular apropiada en una placa de imágenes BD Falcon™ de 96 pocillos (n.º de cat. 353219) y cultive durante la noche a 48 horas. 2. Retire el medio de cultivo de los pocillos, lave los pocillos dos veces con 100 μl de PBS 1× y fije las células añadiendo 100 µl de formaldehído fresco al 3,7 % en PBS o tampón de fijación BD Cytofix™ (n.º de cat. 554655) a cada pocillo e incubándolo durante 10 minutos a temperatura ambiente (TA). 3. Retire el fijador de los pocillos y lave los pocillos dos veces con 100 μl de PBS 1×. 4. Diluya el anticuerpo 1:10 en PBS 1× y tiña las células añadiendo 50 µl del conjugado de anticuerpo diluido a cada pocillo e incubándolo durante 1 hora a temperatura ambiente. 5. Retire el anticuerpo diluido y lave los pocillos dos veces con 100 µl de PBS 1×. 6. Retire el PBS y contratine los núcleos añadiendo 100 µl de una solución de 2 µg/ml de Hoechst 33342 (p. ej., Sigma-Aldrich Cat. No. B2261) en PBS 1× a cada pocillo al menos 15 minutos antes de la adquisición de imágenes. 7. Observe y analice las células en un instrumento de adquisición de imágenes adecuado. Los filtros recomendados para los analizadores de células BD Pathway™ son: Instrumento Excitación Emisión Dicroico BD Pathway 855 488/10 515 LP Fura/FITC BD Pathway 435 482/35 536/40 FF506
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso en el volumen recomendado por prueba cuando se sigue el procedimiento de ensayo recomendado. Una prueba es típicamente ~10,000 células cultivadas en un pocillo de una placa de imágenes de 96 pocillos. Alexa Fluor® es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR. Los conjugados de anticuerpos de los colorantes Alexa Fluor®, Pacific Blue™ y Cascade Blue® en este producto se venden bajo licencia de Molecular Probes, Inc. solo para uso en investigación, excluyendo el uso en combinación con microarrays o como reactivos específicos de analito. Los colorantes Alexa Fluor® (excepto Alexa Fluor® 430), el colorante Pacific Blue™ y el colorante Cascade Blue® están cubiertos por patentes pendientes y emitidas. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources.