BD, 560249, BD Pharmingen™ Cóctel de células T reguladoras humanas

Aplicación: Citometría de flujo (probada durante el desarrollo)
Estado regulatorio: RUO
ID de registro: AB_1645496
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Descripción: Descripción El cóctel de células T reguladoras humanas es un reactivo de tres colores que se utiliza para identificar la población natural de células T reguladoras (nTreg). Un patrón de expresión de CD4+CD25 int /brightCD127 dim se correlaciona estrechamente con la expresión del factor de transcripción Forkhead box P3 (FoxP3). FoxP3 se considera un marcador específico de las células T reguladoras (Tregs). El anticuerpo SK3 reconoce CD4, un antígeno expresado principalmente en linfocitos T colaboradores/inductores, aunque este antígeno también está presente en baja densidad en los monocitos. El anticuerpo 2A3 reconoce CD25, un antígeno también conocido como receptor de interleucina-2 de baja afinidad humano (IL-2R). El antígeno CD25 está presente en un subconjunto de linfocitos de sangre periférica. La densidad del antígeno aumenta en los linfocitos T activados por fitohemaglutinina (PHA), concanavalina A (Con A) y CD3; linfocitos T de cultivos mixtos de linfocitos; y líneas de leucemia linfocítica T infectadas con el virus de la leucemia linfocítica humana (HTLV). El HIL-7R-M21 reacciona con la glucoproteína CD127, de 60-90 kDa. El CD127 también se conoce como receptor alfa de IL-7 (IL-7Rα). Este receptor es un heterodímero compuesto por el CD127 y la cadena gamma común, compartida por otros receptores de citocinas (IL-2R, IL-4R, IL-9R e IL-15R). El CD127 se expresa en timocitos, progenitores de linfocitos T y B, linfocitos T maduros y algunas células linfoides y mieloides.
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con el colorante en condiciones óptimas y se eliminaron tanto el anticuerpo no conjugado como el colorante libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Las BD® CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar la compensación de fluorescencia. Al unir anticuerpos conjugados con fluorocromos a las BD® CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos, puede haber pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de compensación que difieren de los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, se compare la compensación en las células y en las BD® CompBeads para garantizar que estas sean adecuadas para su aplicación celular específica.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Advertencia: Algunos conjugados APC-Cy7 y PE-Cy7 muestran cambios en su espectro de emisión con la exposición prolongada al formaldehído. Si no puede analizar las muestras fijadas en cuatro horas, le recomendamos que utilice el fijador estabilizador BD™ (n.º de cat. 338036). Para conocer los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. PE-Cy7 es un fluorocromo en tándem compuesto por R-ficoeritrina (PE), que se excita con luz de 488 nm y actúa como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy7, que actúa como aceptor de energía y presenta una fluorescencia máxima a 780 nm. La emisión del fluorocromo en tándem PE-Cy7 se recoge en un detector para longitudes de onda de fluorescencia de 750 nm y superiores. Si bien se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, pueden observarse diferencias en la emisión residual de PE. Por lo tanto, recomendamos realizar controles de compensación individuales para cada conjugado PE-Cy7. PE-Cy7 está optimizado para su uso con un único láser de iones de argón que emite luz de 488 nm, y no existe una superposición significativa entre los espectros de emisión de PE-Cy7 y FITC. Al utilizar citómetros de doble láser, que pueden excitar directamente tanto PE como Cy7, recomendamos el uso de compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o compensación de software durante el análisis de datos. Cy es una marca registrada de GE Healthcare. Los conjugados de anticuerpos de los colorantes Alexa Fluor®, Pacific Blue™ y Cascade Blue® de este producto se venden bajo licencia de Molecular Probes, Inc. exclusivamente para uso en investigación, excluyendo su uso en combinación con microarrays o como reactivos específicos para analitos. Los colorantes Alexa Fluor® (excepto Alexa Fluor® 430), Pacific Blue™ y Cascade Blue® están cubiertos por patentes pendientes y emitidas. La emisión del fluorocromo Alexa Fluor® 647 se recopila con la misma configuración del instrumento que para la aloficocianina (APC). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las hojas de datos de seguridad (SDS). Cy es una marca comercial de Global Life Sciences Solutions Germany GmbH o una afiliada que opera como Cytiva. Este producto se proporciona bajo una licencia de propiedad intelectual entre Life Technologies Corporation y BD Businesses. La compra de este producto transmite al comprador el derecho intransferible de usar la cantidad comprada del producto y los componentes del producto en la investigación realizada por el comprador (ya sea el comprador una entidad académica o con fines de lucro). El comprador no puede vender ni transferir de otro modo (a) este producto (b) sus componentes o (c) materiales fabricados con este producto o sus componentes a un tercero ni utilizar de otro modo este producto o sus componentes o materiales fabricados con este producto o sus componentes para fines comerciales. Fines comerciales significa cualquier actividad realizada por una parte a cambio de una contraprestación y puede incluir, entre otros: (1) el uso del producto o sus componentes en la fabricación; (2) uso del producto o sus componentes para proporcionar un servicio, información o datos; (3) uso del producto o sus componentes para fines terapéuticos, diagnósticos o profilácticos; o (4) reventa del producto o sus componentes, independientemente de si dicho producto o sus componentes se revenden para su uso en investigación. Para obtener información sobre la compra de una licencia de este producto para cualquier otro uso, comuníquese con Life Technologies Corporation, Cell Analysis Business Unit Business Development, 29851 Willow Creek Road, Eugene, OR 97402, EE. UU., Tel.: (541) 465-8300. Fax: (541) 335-0504. Alexa Fluor™ es una marca registrada de Life Technologies Corporation. Observe las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; Por lo tanto, recomendamos que se tomen precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con esos reactivos, a la iluminación ambiental.
Descripción: Clon: Isotipo: ID de EntrezGene
N/A: N/A: | IgG1, κ, IgG1, κ, IgG1, κ: N/A