BD, 560617, BD Pharmingen™ PE-Cy™7 Rata Antirratón CD185 (CXCR5)

Nombre alternativo: Blr1; Receptor de quimiocina CXC tipo 5; CXC-R5; CXCR-5; Gpcr6; MDR15
Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: LOU de rata, también conocida como Louvain, LOU/C, LOU/M IgG2a, κ
Inmunógeno: CXCR5 de ratón
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_1727521
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy7 en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy7 libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Citometría de flujo: Se sabe que los receptores de quimiocinas se internalizan durante la manipulación, lo que resulta en una expresión de baja frecuencia. Se recomienda a los investigadores realizar estudios de inmunofenotipado de los receptores de quimiocinas en muestras recién recolectadas (<24 horas). La incubación con el anticuerpo debe realizarse a 4 °C en la oscuridad. La manipulación celular, como la separación de Ficoll, la congelación o la exposición a temperaturas frías antes de la tinción, debe minimizarse y se ha demostrado que causa una disminución en la intensidad de la tinción y/o resultados inconsistentes. Los investigadores deben tener en cuenta que pueden ser necesarios procedimientos de tinción alternativos. En algunos casos, se recomienda encarecidamente un procedimiento de tinción de varios pasos para amplificar las señales inmunofluorescentes para el análisis citométrico de flujo de la expresión de CXCR5 en ratones. Los investigadores pueden encontrar útil el anticuerpo anti-ratón CXCR5 purificado de rata (n.° de cat. 551961) junto con reactivos secundarios y terciarios apropiados para detectar la expresión de baja frecuencia, como con el anticuerpo anti-rata IgG2a con biotina de ratón (n.° de cat. 553894) y la estreptavidina PE (n.° de cat. 554061) o la estreptavidina PE-Cy™7 (n.° de cat. 557598).
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Advertencia: Algunos conjugados APC-Cy7 y PE-Cy7 muestran cambios en su espectro de emisión con la exposición prolongada al formaldehído. Si no puede analizar las muestras fijadas en cuatro horas, le recomendamos que utilice el fijador estabilizador BD™ (n.º de cat. 338036). Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que se produce en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la iluminación ambiental. PE-Cy7 es un fluorocromo en tándem compuesto por R-ficoeritrina (PE), que se excita con luz de 488 nm y actúa como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy7, que actúa como aceptor de energía y presenta una fluorescencia máxima de 780 nm. La emisión del fluorocromo en tándem PE-Cy7 se capta en un detector para longitudes de onda de fluorescencia de 750 nm y superiores. Si bien se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, pueden observarse diferencias en la emisión residual de PE. Por lo tanto, recomendamos realizar controles de compensación individuales para cada conjugado de PE-Cy7. PE-Cy7 está optimizado para su uso con un único láser de iones de argón que emite luz de 488 nm, y no existe una superposición significativa entre los espectros de emisión de PE-Cy7 y FITC. Al utilizar citómetros de doble láser, que pueden excitar directamente tanto el PE como el Cy7, recomendamos usar la compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o la compensación por software durante el análisis de datos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Cy es una marca registrada de GE Healthcare. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.