BD, 560726, BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Anti-CD194 humano de ratón

Nombre alternativo: CCR4; Receptor de quimiocina CC tipo 4; CMKBR4; K5-5
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: Ratón C57BL/6 IgG1, κ
Inmunógeno: Línea celular transfectada con CCR4 humano
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
Número de taller: HCDM 2006
ID de registro: AB_1727416
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PerCP-Cy5.5 en condiciones óptimas, eliminándose tanto el anticuerpo no conjugado como el PerCP-Cy5.5 libre. No se recomienda almacenar los conjugados de PerCP-Cy5.5 en un diluyente no optimizado, ya que podría producirse una pérdida de intensidad de la señal.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Citometría de flujo: Se sabe que los receptores de quimiocinas se internalizan durante la manipulación, lo que resulta en una expresión de baja frecuencia. Se recomienda a los investigadores realizar estudios de inmunofenotipado de los receptores de quimiocinas en muestras recién recolectadas (<24 horas). La incubación con el anticuerpo debe realizarse a 4 °C en la oscuridad. La manipulación celular, como la separación de Ficoll, la congelación o la exposición a temperaturas frías antes de la tinción, debe minimizarse y se ha demostrado que causa una disminución en la intensidad de la tinción y/o resultados inconsistentes. Los investigadores deben tener en cuenta que pueden ser necesarios procedimientos de tinción alternativos. La tinción de varios pasos puede ser útil, en algunos casos, para amplificar las señales inmunofluorescentes para el análisis de citometría de flujo de CD194 (CCR4). Los investigadores pueden encontrar que el anticuerpo anti-CD194 humano de ratón purificado (MN 551121) es útil junto con reactivos secundarios y terciarios apropiados para detectar la expresión de baja frecuencia, como con Ig de cabra anti-ratón biotina (MN 553999) y estreptavidina PE (MN 554061) o estreptavidina PerCP-Cy™5.5.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con esos reactivos, a la iluminación ambiental. Cy es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Este producto conjugado se vende bajo licencia de las siguientes patentes: Patentes de EE. UU. n.º 5.486.616; 5.569.587; 5.569.766; 5.627.027. Este producto está sujeto a los derechos de propiedad de Amersham Biosciences Corp. y la Universidad Carnegie Mellon, y se fabrica y vende bajo licencia de Amersham Biosciences Corp. Este producto tiene licencia de venta únicamente para investigación. No tiene licencia para ningún otro uso. Si necesita una licencia comercial para usar este producto y no la tiene, devuelva este material sin abrir a BD Biosciences, 10975 Torreyana Rd, San Diego, CA 92121 y se le reembolsará el dinero pagado por el material. PerCP-Cy5.5 está optimizado para su uso con un solo láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem, se debe tener especial cuidado al utilizar citómetros de láser dual, que pueden excitar directamente tanto PerCP como Cy5.5™. Recomendamos el uso de compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o compensación de software durante el análisis de datos. Los anticuerpos marcados con PerCP-Cy5.5 pueden utilizarse con reactivos marcados con FITC y R-PE en citómetros de flujo de láser único sin superposición espectral significativa de la fluorescencia de PerCP-Cy5.5, FITC y R-PE. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para obtener información sobre los protocolos técnicos.