BD, 561020, BD Pharmingen™ PE Rata Anti-Ratón IL-17A

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: LEW de rata, también conocido como Lewis IgG1, κ
Inmunógeno: proteína IL-17A recombinante de ratón
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_397256
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis por citometría de flujo: El anticuerpo TC11-18H10 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-17A en poblaciones celulares mixtas. El anticuerpo TC11-18H10 conjugado con PE (n.° de cat. 559502) es especialmente adecuado para estos experimentos (véase la imagen). Para una tinción inmunofluorescente y un análisis por citometría de flujo óptimos, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,25 µg de mAb/millón de células). Para la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y vaya a la sección de protocolos o al capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de Función Inmunitaria. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es prebloquear las células diana fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo TC11-18H10 no marcado (N.º de cat. 559501) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en ratón fijado con paraformaldehído/permeabilizado con saponina es PE-R3-34 (N.º de cat. 554685); úselo en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,25 µg mAb/1 millón de células). OTRAS APLICACIONES 1. Captura ELISA: El anticuerpo TC11-18H10 purificado (Cat. No. 555068) es útil como anticuerpo de captura para un ELISA sándwich para medir los niveles de proteína IL-17A de ratón. El anticuerpo TC11-18H10 purificado puede ser emparejado con el anticuerpo TC11-8H4 biotinilado (Cat. No. 555067) como anticuerpo detector, con proteína IL-17A de ratón recombinante como el estándar. El anticuerpo TC11-18H10 purificado debe titularse de 0.5 µg/ml a 2.0 µg/ml para determinar su concentración óptima para la captura ELISA. Para obtener curvas estándar lineales, se recomiendan diluciones dobles de IL-17A de ratón que oscilen entre ~2,000 y 15 pg/ml para su inclusión en cada placa ELISA. Para conocer la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre ELISA en el Manual de Función Inmunitaria. 2. Western blot: El anticuerpo TC11-1810 ha demostrado ser útil para el Western blot. Tenga en cuenta que esta aplicación no se prueba de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen. 3. Neutralización: Se ha demostrado que el TCII-18H10 es un anticuerpo neutralizante. Tenga en cuenta que esta aplicación no se prueba de forma rutinaria en BD Biosciences.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Para consultar los protocolos técnicos, visite www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.