BD, 561036, BD Pharmingen™ PE-Cy™7 Anti-IFN-γ humano de ratón

Nombre alternativo: IFNG; Interferón gamma; IFG; IFI; Interferón tipo II
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: Ratón BALB/c IgG1, κ
Inmunógeno: IFN-γ humano de sobrenadantes de PBMC estimuladas con S. aureus
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_396894
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy7 en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy7 libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo anti-IFN-γ humano de ratón PE-Cy™7 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IFN-γ en poblaciones celulares mixtas. Para conocer la metodología específica, visite nuestro sitio web, http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources, y vaya a la sección de protocolos en "Tinción intracelular". Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con anti-IFN-γ humano de ratón purificado (n.° de cat. 554549) antes de la tinción. La técnica de tinción y los controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo IgG1 de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es el control de isotipo IgG1 κ de ratón PE-Cy™7 (n.° de cat. 557646); utilícelo en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ¡ 0,5 µg mAb/1 millón de células).
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. PE-Cy7 es un fluorocromo en tándem compuesto de R-ficoeritrina (PE), que se excita con luz de 488 nm y sirve como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy7, que actúa como aceptor de energía y fluoresce máximamente a 780 nm. La emisión del fluorocromo en tándem PE-Cy7 se recoge en un detector para longitudes de onda de fluorescencia de 750 nm y superiores. Aunque se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, se pueden observar diferencias en la emisión residual de PE. Por lo tanto, recomendamos realizar controles de compensación individuales para cada conjugado de PE-Cy7. El PE-Cy7 está optimizado para su uso con un único láser de iones de argón que emite luz de 488 nm, y no existe una superposición significativa entre los espectros de emisión de PE-Cy7 y FITC. Al utilizar citómetros de doble láser, que pueden excitar directamente tanto PE como Cy7, recomendamos el uso de compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o compensación de software durante el análisis de datos. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que se produce en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la iluminación ambiental. Advertencia: Algunos conjugados APC-Cy7 y PE-Cy7 presentan cambios en su espectro de emisión con la exposición prolongada al formaldehído. Si no puede analizar las muestras fijadas en un plazo de cuatro horas, le recomendamos utilizar el fijador estabilizador BD™ (n.° de cat. 338036). Es posible que la reactividad cruzada detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Cy es una marca registrada de GE Healthcare. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources.