BD, 561063, BD Pharmingen™ PE Rata Anti-TNF de Ratón

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: TNF de ratón recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395380
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: El anticuerpo MP6-XT22 conjugado con PE puede utilizarse para la tinción inmunofluorescente multicolor y los análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de TNF en poblaciones celulares mixtas (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente óptima con el análisis de citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para consultar la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo MP6-XT22 conjugado con un exceso molar de ligando (p. ej., TNF murino recombinante; n.º de cat. 554589) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo MP6-XT22 no marcado (n.º de cat. 554416) antes de la tinción. La técnica de tinción y los controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón y humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es PE-R3-34 (n.º de cat. 554685); utilizar en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg mAb/1 millón de células).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.