BD, 561570, Kit de código de barras para celdas fluorescentes violetas BD Phosflow™

Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Estado regulatorio: RUO
Descripción: Descripción El código de barras de células fluorescentes es una técnica que facilita las aplicaciones de citometría de flujo multiparamétrica de alto rendimiento al permitir que múltiples muestras de células diana se combinen en un solo tubo para tinción y análisis multicolor. Cada muestra celular está "codificada con barras", utilizando uno o dos tintes fluorescentes unidos covalentemente; cada tinte se utiliza en hasta tres concentraciones específicas. Esto permite que las muestras celulares se distingan por citometría de flujo multicolor en función de sus distintas longitudes de onda e intensidades de emisión de fluorescencia. Las muestras de células multiplexadas con código de barras se pueden teñir además con anticuerpos fluorescentes que son específicos para antígenos CD y proteínas de señalización fosforiladas intracelulares. Por lo tanto, el código de barras de células fluorescentes permite un enfoque de alto rendimiento para determinar los perfiles de señalización de subconjuntos de leucocitos. Los análisis que podrían beneficiarse de esta técnica de código de barras incluyen (pero no se limitan a) estudios de múltiples donantes, dosis-respuesta y/o curso temporal para modificadores de la respuesta celular (p. ej., fármacos, citocinas, activadores policlonales, adyuvantes). El kit de codificación de barras de células fluorescentes violetas BD Phosflow™ proporciona reactivos para codificar con éxito subconjuntos de células T de muestras de sangre completa humana con el fin de estudiar la inducción de proteínas fosforiladas en las vías de señalización de la quinasa MAP y JAK/STAT. El kit incluye dos colorantes fluorescentes, el colorante de codificación de barras celular 450 (CBD450) y el colorante de codificación de barras celular 500 (CBD500), tampón de lavado de codificación de barras de células fluorescentes y un anticuerpo específico de fosfositios para la codificación de barras y la inmunotinción de muestras de células fijadas y permeabilizadas. Los colorantes de codificación de barras se utilizan en varias concentraciones, ya sea por separado o en combinación, para codificar con barras hasta dieciséis muestras de células diferentes. El kit ofrece una opción de un anticuerpo específico de fosfositios conjugado con Alexa Fluor® 647 que se puede utilizar para analizar eventos de señalización intracelular. Los siguientes anticuerpos fosfoespecíficos están disponibles para elegir: ERK1/2 (pT202/pY204); p38 MAPK (pT180/pY182); Stat1 (pY701); Stat3 (pY705); Stat5 (pY694); o Stat6 (pY641). Se ha demostrado que cada uno de estos anticuerpos tiñe linfocitos humanos de sangre periférica fijados y permeabilizados con código de barras. Los anticuerpos fluorescentes específicos para marcadores de superficie asociados a linfocitos T se han validado para su uso con el kit de código de barras celular fluorescente violeta, utilizando el procedimiento de fijación y permeabilización especificado en este kit. Los reactivos de lisado/fijación y permeabilización deben pedirse por separado. Las muestras celulares preparadas con los reactivos proporcionados o especificados en este kit pueden analizarse con los sistemas de citómetro de flujo BD FACSCanto™ II, BD LSRFortessa™ o BD™ LSR II.