BD, 561609, Panel de células T de memoria/naive de ratón BD Pharmingen™

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Estado regulatorio: RUO
ID de registro: AB_2869387
Descripción: Descripción Nota: El panel tiene un tamaño de 50 pruebas. Se proporciona material extra para cada componente para 10 pruebas adicionales con fines de configuración del instrumento. Los anticuerpos se suministran en una solución tamponada acuosa que contiene BSA, estabilizador de proteínas y ≤ 0,09 % de azida sódica. La tinción inmunofluorescente multicolor seguida de análisis y clasificación por citometría de flujo ha llevado a la caracterización fenotípica y funcional de múltiples subconjuntos de células T periféricas. Tres subconjuntos principales de células T han sido bien caracterizados, es decir, células T vírgenes, de memoria y efectoras. Las células T de ratón vírgenes tienen un fenotipo de superficie celular relativamente homogéneo. Expresan altos niveles del receptor de localización en los ganglios linfáticos periféricos, CD62L (L-selectina), y niveles bajos a intermedios de la molécula de adhesión, CD44 (Pgp-1). Las células T efectoras coexpresan niveles variables a bajos de CD62L y niveles altos de CD44, mientras que las células T de memoria coexpresan niveles variables a altos de CD62L y niveles altos de CD44. El panel de linfocitos T de memoria/naive de ratón contiene anticuerpos fluorescentes (cada uno optimizado a 5 μl por prueba) específicos para los antígenos de superficie celular: CD44, CD62L, CD4 y CD3. El panel se diseñó para estandarizar la tinción multicolor y la caracterización por citometría de flujo de los tres subgrupos principales de linfocitos T CD4+ que surgen como consecuencia del desarrollo o la expansión clonal y la diferenciación impulsada por estimulación antigénica (p. ej., en respuesta a alérgenos, enfermedades infecciosas o vacunación). Este panel de anticuerpos fluorescentes se diseñó con flexibilidad para permitir al investigador la incorporación de anticuerpos/sondas conjugados con FITC o Alexa Fluor® 488, o células que expresan proteínas fluorescentes verdes, en el análisis por citometría de flujo de subgrupos de linfocitos T de ratón.
Preparación y almacenamiento: Preparación y almacenamiento Almacenar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante del cultivo de tejidos o ascitis por cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y el PE libre. El anticuerpo se conjugó con PerCP-Cy5.5 en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y el PerCP-Cy5.5 libre. No se recomienda el almacenamiento de conjugados de PerCP-Cy5.5 en un diluyente no optimizado, ya que puede provocar la pérdida de intensidad de la señal. El anticuerpo se conjugó con APC en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y el APC libre. El anticuerpo se conjugó con APC-Cy7 en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y el APC-Cy7 libre.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para conocer los espectros de fluorocromos y los ajustes adecuados del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Observe las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con esos reactivos, a la iluminación ambiental. Los anticuerpos marcados con PerCP-Cy5.5 pueden utilizarse con reactivos marcados con FITC y R-PE en citómetros de flujo de láser único sin superposición espectral significativa de la fluorescencia de PerCP-Cy5.5, FITC y R-PE. PerCP-Cy5.5 está optimizado para su uso con un láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem, se debe tener especial cuidado al utilizar citómetros de láser dual, ya que pueden excitar directamente tanto PerCP como Cy5.5™. Recomendamos el uso de compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o compensación de software durante el análisis de datos. Este producto está sujeto a los derechos de propiedad de Amersham Biosciences Corp. y la Universidad Carnegie Mellon, y se fabrica y vende bajo licencia de Amersham Biosciences Corp. Este producto tiene licencia de venta únicamente para investigación. No tiene licencia para ningún otro uso. Si necesita una licencia comercial para usar este producto y no la tiene, devuelva este material sin abrir a BD Biosciences, 10975 Torreyana Rd, San Diego, CA 92121 y se le reembolsará el dinero pagado por el material. Este reactivo conjugado con APC se puede usar en cualquier citómetro de flujo equipado con un láser de colorante, HeNe o diodo rojo. APC-Cy7 es un fluorocromo en tándem compuesto de aloficocianina (APC), que se excita mediante líneas láser entre 595 y 647 nm y sirve como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy7™, que actúa como aceptor de energía y fluoresce a 780 nm. BD Biosciences Pharmingen ha maximizado la transferencia de energía del fluorocromo en APC-Cy7, maximizando así su intensidad de emisión de fluorescencia, minimizando la emisión residual de APC y minimizando la compensación electrónica requerida en sistemas de citometría de flujo multiláser-láser. Nota: Si bien se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la emisión residual de APC, se recomienda encarecidamente analizar cada lote para detectar diferencias en la compensación requerida y realizar controles de compensación individuales para cada conjugado APC-Cy7. La emisión del fluorocromo en tándem APC-Cy7 se recoge en un detector para longitudes de onda de fluorescencia de 750 nm y superiores. Advertencia: Algunos conjugados APC-Cy7 y PE-Cy7 muestran cambios en su espectro de emisión con la exposición prolongada al formaldehído. Si no puede analizar las muestras fijadas en un plazo de cuatro horas, le recomendamos utilizar el fijador estabilizador BD™ (n.° de cat. 338036). Cy es una marca registrada de GE Healthcare. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.
Descripción: Cantidad/Tamaño: Número de pieza: ID de EntrezGene
N/D : 60.0 : N/D : N/D