BD, 561686, BD Pharmingen™ PE-Cy™5 Ratón anti-CD11b humano

Nombre alternativo: MAC-1A; Mac-1; ITGAM; Integrina alfa M; CR3A; CR-3 alfa; Mo1; SLEB6
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: Monocitos humanos
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
Número de taller: IV M047
ID de registro: AB_395790
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy5 (anteriormente conocido como BD Cy-Chrome™) en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy5 libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Las BD™CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar la compensación de fluorescencia. Al unir anticuerpos conjugados con fluorocromos a las CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos, puede haber pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de compensación que difieren de los de los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, se compare la compensación en las células y en las CompBeads para garantizar que las BD Comp Beads sean adecuadas para su aplicación celular específica.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. PE-Cy5 está optimizado para su uso con un solo láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem PE-Cy5, se debe tener especial cuidado al usar citómetros de láser dual que pueden excitar directamente tanto PE como Cy5™. PE-Cy5 es un fluorocromo en tándem compuesto por R-ficoeritrina (PE), que se excita con la luz de 488 nm de un láser de iones de argón y actúa como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy5, que actúa como aceptor de energía y fluoresce a 670 nm. BD Biosciences Pharmingen ha maximizado la transferencia de energía del fluorocromo en PE-Cy5, maximizando así la intensidad de su emisión de fluorescencia, minimizando la emisión residual de PE y la variación entre lotes. Se ha descrito que los fluorocromos en tándem PE-Cy5 se unen a algunas clases de macrófagos y granulocitos humanos a través de receptores Fc, y que PE se une a linfocitos B de ratón a través de receptores Fc. La preincubación de leucocitos de ratón con el anticuerpo monoclonal anti-CD16/CD32 de ratón purificado Mouse BD Fc Block™ 2.4G2 puede reducir la unión no específica de los reactivos conjugados con PE-Cy5 a las células B de ratón. Sin embargo, los reactivos conjugados con PE-Cy5 no deben usarse para teñir esplenocitos de ratones SJL, NOD y MRL, ya que se ha informado que los linfocitos B u otros leucocitos se tiñen de forma no específica independientemente del uso de Mouse BD Fc Block™ (el complejo CD72c se ha implicado en la unión de PE-Cy5 en estas cepas). Los reactivos conjugados con los fluorocromos en tándem PE, PerCP, PerCP-Cy5.5, APC y APC-Cy7 pueden usarse en leucocitos de estas cepas de ratón. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; Por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la luz ambiental. Para consultar los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Cy es una marca registrada de GE Healthcare. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Es posible que la reactividad cruzada detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.