BD, 562035, BD Pharmingen™ PE Anti-IL-10 humana para ratas

Nombre alternativo: Interleucina-10; CSIF; Factor inhibidor de la síntesis de citocinas; TGIF
Reactividad: Humana (Prueba de control de calidad), Viral (Probado en desarrollo)
Isotipo: IgG2a de rata, κ
Inmunógeno: IL-10 humana recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (probada rutinariamente), captura ELISA, neutralización (probada durante el desarrollo)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_397227
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: 1. Tinción inmunofluorescente y análisis por citometría de flujo: El anticuerpo JES3-19F1 conjugado con PE (n.° de cat. 559330) puede utilizarse para la tinción inmunofluorescente multicolor y el análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-10 en poblaciones celulares mixtas (véase la imagen). Esta formulación de 100 muestras del anticuerpo JES3-19F1 conjugado con PE ha sido pretitulada para garantizar la detección intracelular eficaz de IL-10 humana utilizando 20 µl/1 x 10^6 células. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo conjugado JES3-19F1 con ligando (IL-10 humana recombinante; n.º de cat. 554611) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo JES3-19F1 no marcado (n.º de cat. 554705) antes de la tinción. La técnica de tinción y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. También está disponible un control de isotipo IgG2a de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina en una formulación de 100 Test Size PE-R35-95 (n.º de cat. 559317). Las BD™ CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar el derrame de fluorescencia (compensación). Cuando los anticuerpos conjugados con fluorocromos se unen a CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos, puede haber pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de derrame que difieren al compararlos con los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, se compare el derrame en la célula y en CompBead para garantizar que las perlas BD Comp sean adecuadas para su aplicación celular específica. 2. Captura ELISA: El anticuerpo purificado JES3-19F1 (n.° de cat. 554705) es útil como anticuerpo de captura para un ELISA sándwich para medir específicamente los niveles de la proteína IL-10 humana. El anticuerpo purificado JES3-19F1 puede combinarse con el anticuerpo biotinilado JES3-12G8 (n.° de cat. 554499) como anticuerpo de detección y con la proteína IL-10 humana recombinante (n.° de cat. 554611) como estándar. Para analizar IL-10 en suero o plasma, se recomienda nuestro kit OptEIA™ (n.° de cat. 555134). 3. Neutralización: El formato NA/LE™ del clon JES3-19F1 (n.° de cat. 559330) es útil para neutralizar la bioactividad de IL-10 humana. Un control de isotipo NA/LE de IgG2a de rata adecuado para el anticuerpo NA/LE JES3-19F1 es el anticuerpo R35-95 (n.° de cat. 554687).
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Es posible que la reactividad cruzada de especies detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las hojas de datos de seguridad (SDS). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos.