BD, 562038, BD Pharmingen™ PE Anti-IL-12 de ratón (p40/p70)

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: proteína p70 IL-12 de ratón recombinante expresada en CHO
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395420
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis por citometría de flujo: El anticuerpo C15.6 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-12 en poblaciones celulares mixtas. Los anticuerpos C15.6 conjugados con PE y APC son especialmente adecuados para estos experimentos (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente y un análisis por citometría de flujo óptimos, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para la metodología específica, consulte el Manual de Función Inmunitaria en nuestro sitio web www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo PE-C15.6 con exceso de ligando antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo C15.6 sin marcar (p. ej., Cat. No. 554477) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Una inmunoglobulina de control de isotipo IgG1 de rata adecuada para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón o humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es la inmunoglobulina PE-R3-34 (Cat. No. 554685); usar en concentraciones comparables al anticuerpo de interés. ELISA: El anticuerpo C15.6 purificado (Cat. No. 551219) es útil como anticuerpo de captura para un ELISA sándwich para medir los niveles de proteína IL-12 p40 de ratón. El anticuerpo C15.6 purificado puede combinarse con el anticuerpo C17.8 biotinilado (n.° de cat. 554476) como anticuerpo de detección, utilizando la proteína p40 de IL-12 de ratón recombinante (n.° de cat. 554594) como estándar. Para analizar la p40 de IL-12 de ratón en fluidos biológicos complejos, como suero o plasma, se recomienda nuestro kit de ELISA sándwich OptEIA™ específico para IL-12 de ratón (n.° de cat. 555165).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.