BD, 562047, BD Pharmingen™ FITC Anti-IL-4 Humana de Rata

Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: IL-4 humana recombinante purificada
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_395423
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con FITC en condiciones óptimas y se eliminó el FITC no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo MP4-25D2 conjugado con FITC se puede utilizar para la tinción inmunofluorescente multicolor y el análisis citométrico de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-4 dentro de poblaciones celulares mixtas (ver imagen, panel izquierdo). Para una tinción inmunofluorescente óptima para el análisis citométrico de flujo, este anticuerpo debe titularse (≤ 0,5 µg mAb/millón de células). Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es el siguiente: prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo MP4-25D2 no marcado (n.º de cat. 554482) antes de la tinción. La técnica de tinción de citocinas intracelulares y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es la inmunoglobulina FITC-R3-34 (n.° de cat. 554684); úsela en concentraciones comparables a las del anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg mAb/1 millón de células). Para conocer la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de Función Inmunitaria. Detección mediante ELISA: El anticuerpo biotinilado MP4-25D2 (n.° de cat. 554483) es útil como anticuerpo de detección para un ELISA tipo sándwich que mide los niveles de proteína IL-4 humana. El anticuerpo MP4-25D2 biotinilado puede combinarse con el anticuerpo 8D4-8 purificado (n.° de cat. 554515) como anticuerpo de captura, utilizando la proteína IL-4 humana recombinante (n.° de cat. 554605) como estándar. Para el análisis de IL-4 en suero o plasma, se recomienda el kit ELISA BD OptEIA™ Human IL-4 (n.° de cat. 555194) o el kit ELISA BD OptEIA™ Human IL-4 (n.° de cat. 550614). Neutralización: Se ha descrito que el formato NA/LE del anticuerpo MP4-25D2 (n.° de cat. 554481) es útil para neutralizar la bioactividad de la IL-4 humana. Un control de isotipo IgG1 de rata NA/LE™ adecuado para el anticuerpo MP4-25D2 NA/LE™ es el anticuerpo R3-34, cat. N° 554683.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.