BD, 562082, BD Pharmingen™ FITC Anti-TNF humano de ratón

Nombre alternativo: Factor de necrosis tumoral alfa; TNF-a; TNF-a; TNFSF2; caquectina
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: TNF humano recombinante
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_395443
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con FITC en condiciones óptimas y se eliminó el FITC no reaccionado.
Procedimientos de ensayo recomendados: El anticuerpo MAb11 conjugado con FITC puede utilizarse para la tinción inmunofluorescente multicolor y los análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de TNF en poblaciones celulares mixtas (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente óptima con el análisis de citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para consultar la metodología específica, visite la sección de protocolos en "Citocinas (Tinción intracelular)" o "Flujo intracelular" en nuestro sitio web: http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo MAb11 conjugado con un exceso molar de ligando (p. ej., TNF humano recombinante; n.º de cat. 554618) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo MAb11 no marcado (n.º de cat. 554510) antes de la tinción. La técnica de tinción y los controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es FITC-MOPC-21 (n.º de cat. 554679); úselo en concentraciones comparables a las del anticuerpo de interés.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Es posible que la reactividad cruzada entre especies detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.