BD, 562341, BD Pharmingen™ APC Ratón anti-GARP humano

Nombre alternativo: LRRC32; Garpin; Repeticiones de glicoproteína A predominantes
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG2b de ratón, κ
Inmunógeno: LRRC32 humano recombinante
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_10926211
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con APC en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la APC libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Procedimiento de tinción sugerido para el anticuerpo GARP anti-humano APC: 1. Coseche las PBMC después de la estimulación (12 horas) con anti-CD3 humano de ratón NA/LE purificado (n.º de cat. 555329) y anti-CD28 humano de ratón NA/LE purificado (n.º de cat. 555725). 2. Lave las células dos veces con tampón de tinción (p. ej., tampón de tinción BD Pharmingen™ (FBS) (n.º de cat. 554656). 3. Tiña 1 x 10^6 células con el anticuerpo APC anti-GARP humano (n.º de cat. 562341) o con APC Mouse IgG2b, control de isotipo κ (n.º de cat. 555745) durante 30 minutos en hielo, protegido de la luz. 4. Lave las células dos veces con tampón de tinción. 5. Tiña para FoxP3. Consulte la hoja de datos técnicos de BD Horizon™ V450 Mouse Anti-Human FoxP3, n.º de cat. 560459, para obtener un protocolo detallado de tinción de FoxP3. En resumen, a. Añada 2 ml de tampón A 1 x FoxP3 al sedimento celular. b. Centrifugue e incube en 0,5 ml de tampón C durante 30 minutos. c. Lave dos veces Con tampón de tinción y tinción con el anticuerpo anti-FoxP3 humano V450 (n.° de cat. 560459) durante 30-45 minutos. d. Lavar dos veces con tampón de tinción y adquirir en el citometría de flujo. Nota: El kit de tampón para FoxP3 humano BD Pharmingen™ (n.° de cat. 560098) es un producto complementario recomendado.
Avisos del producto: Avisos del producto Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Este reactivo conjugado con APC se puede usar en cualquier citómetro de flujo equipado con un láser de colorante, HeNe o diodo rojo. Para conocer los espectros de fluorocromo y los ajustes adecuados del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Este reactivo ha sido prediluido para su uso en el volumen por prueba recomendado. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba).