BD, 562544, BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Anti-LAP humano de ratón

Nombre alternativo: Péptido asociado a la latencia; TGFB1; TGFbeta; Factor de crecimiento transformante beta
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: Ratón BALB/c IgG1, κ
Inmunógeno: TGF-β1 humano
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (probada rutinariamente), citometría de flujo (probada durante el desarrollo)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_2737644
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PerCP-Cy5.5 en condiciones óptimas, eliminándose tanto el anticuerpo no conjugado como el PerCP-Cy5.5 libre. No se recomienda almacenar los conjugados de PerCP-Cy5.5 en un diluyente no optimizado, ya que podría producirse una pérdida de intensidad de la señal.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Procedimientos de tinción sugeridos para el anticuerpo anti-LAP humano de ratón PerCP-Cy™5.5: 1. Recolectar las PBMC después de la estimulación (24 horas) con anticuerpos anti-CD3 humano de ratón purificado NA/LE (n.° de cat. 555329) y anti-CD28 humano de ratón purificado NA/LE (n.° de cat. 555725) unidos a placa. 2. Lavar las células dos veces con tampón de tinción [p. ej., tampón de tinción BD Pharmingen™ (FBS), n.° de cat. 554656]. 3. Teñir 1 × 10^6 células con anticuerpo anti-CD4 humano de ratón FITC (n.° de cat. 340133) y anticuerpos PerCP-Cy™5.5 IgG1 de ratón, control de isotipo κ (n.° de cat. 550795) o PerCP-Cy™5.5 LAP de ratón anti-humano (n.° de cat. 562544) durante 30 minutos en hielo, protegidos de la luz. 4. Lavar las células dos veces con tampón de tinción. 5. Teñir las células para FoxP3 intracelular con el anticuerpo anti-FoxP3 humano de ratón Alexa Fluor® 647; consultar las fichas técnicas de los n.° de cat. 560889 o 560045 para obtener un protocolo detallado. En resumen, a. Añadir 2 ml de tampón A 1 × FoxP3 al sedimento celular. b. Centrifugar e incubar en 0,5 ml de tampón C durante 30 minutos. c. Lavar las células dos veces con tampón de tinción y teñirlas con el anticuerpo anti-FoxP3 fluorescente durante 30-45 min. d. Lavar las células dos veces con tampón de tinción y analizar mediante citometría de flujo.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso en el volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Cy es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Este producto conjugado se vende bajo licencia de las siguientes patentes: Patentes de EE. UU. n.º 5.486.616; 5.569.587; 5.569.766; 5.627.027. Observe las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; Por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la iluminación ambiental. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Los anticuerpos marcados con PerCP-Cy5.5 se pueden usar con reactivos marcados con FITC y R-PE en citómetros de flujo de láser único sin superposición espectral significativa de la fluorescencia de PerCP-Cy5.5, FITC y R-PE. PerCP-Cy5.5 está optimizado para su uso con un solo láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem, se debe tener especial cuidado al usar citómetros de láser dual, que pueden excitar directamente tanto PerCP como Cy5.5™. Recomendamos el uso de compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o compensación de software durante el análisis de datos. Para obtener información sobre espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Este producto está sujeto a los derechos de propiedad de Amersham Biosciences Corp. y la Universidad Carnegie Mellon, y se fabrica y vende bajo licencia de Amersham Biosciences Corp. Este producto tiene licencia de venta únicamente para investigación. No está autorizado para ningún otro uso. Si necesita una licencia comercial para usar este producto y no la tiene, devuelva este material sin abrir a BD Biosciences, 10975 Torreyana Rd, San Diego, CA 92121, y se le reembolsará el importe pagado por el material.