BD, 562586, BD Phosflow™ PE Ratón anti-Smad2 (pS465/pS467)/Smad3 (pS423/pS425)

Nombre alternativo: SMAD2, SMAD3; MADH2, MADH3; Homólogo 2 de MAD, Homólogo 3 de MAD
Reactividad: Humana (prueba de control de calidad), Ratón (probado en desarrollo), Rata (predicho)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: péptido Smad2 humano fosforilado
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_11151915
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Este conjugado de anticuerpos es adecuado para la tinción intracelular de líneas celulares linfoides humanas, células mononucleares de sangre periférica y esplenocitos de ratón utilizando el tampón de fijación BD Cytofix™ o el tampón de lisina/fijación BD Phosflow™ con el tampón de permeación BD Phosflow™ III (véase la tabla a continuación). Antes de la estimulación, las células se privaron de suero durante la noche a una densidad de 2-10 millones de células/ml en placas de cultivo de tejidos de 96 o 6 pocillos de fondo plano o en tubos de fondo redondo con tapa floja que contenían aproximadamente 100 μL de células en suspensión. Nota: 1. La privación de suero durante 2 horas tras el aislamiento de PBMC no fue suficiente para reducir la fosforilación basal de Smad2 y Smad3. 2. No mezcle ni agite las células no tratadas hasta justo antes de que estén listas para ser fijadas, ya que la agitación de leucocitos primarios humanos o de ratón privados de suero antes de la fijación aumentó la fosforilación de Smad2/3, incluso en ausencia de TGF-β exógeno.
Avisos del producto: Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente utilizamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Para obtener información sobre los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos.