BD, 562697, BD Phosflow™ PE-CF594 Anti-Smad2 (pS465/pS467)/Smad3 (pS423/pS425) de ratón

Nombre alternativo: SMAD2, SMAD3; MADH2, MADH3; Homólogo 2 de MAD, Homólogo 3 de MAD
Reactividad: Humana (prueba de control de calidad), Ratón (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: péptido Smad2 humano fosforilado
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_2737728
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con BD Horizon™ PE-CF594 en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-CF594 libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Este anticuerpo fluorescente es adecuado para la tinción intracelular de líneas celulares linfoides humanas, células mononucleares de sangre periférica y esplenocitos de ratón utilizando el tampón de fijación BD Cytofix™ o el tampón de lisina/fijación BD Phosflow™ con el tampón de permeación BD Phosflow™ III (véase la tabla a continuación). Antes de la estimulación, las células se mantuvieron en ayunas durante la noche a una densidad de 2-10 x 10^6 células/ml en placas de cultivo tisular de fondo plano de 96 o 6 pocillos o en tubos de fondo redondo con tapa floja que contenían aproximadamente 100 ml de células en suspensión. Nota: 1. La ayunas de suero durante 2 horas tras el aislamiento de las PBMC no fue suficiente para reducir la fosforilación basal de Smad2 y Smad3. 2. No mezcle ni agite las células no tratadas hasta justo antes de que estén listas para ser fijadas, ya que la agitación de leucocitos primarios humanos o de ratón privados de suero antes de la fijación aumentó la fosforilación de Smad2/3, incluso en ausencia de TGF-β exógeno.
Avisos del producto: Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente utilizamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que se produce en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la iluminación ambiental. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Texas Red es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR. CF™ es una marca registrada de Biotium, Inc. Al ser excitado por el láser amarillo-verde (561 nm), la fluorescencia puede ser más brillante que al ser excitado por el láser azul (488 nm). Este producto se proporciona bajo un Acuerdo entre BIOTIUM y BD Biosciences. La fabricación, uso, venta, oferta de venta o importación de este producto están sujetos a una o más patentes o solicitudes pendientes de propiedad o licencia de Biotium, Inc. Este producto, y solo en la cantidad adquirida por el comprador, puede utilizarse exclusivamente para su propia investigación interna, de conformidad con la documentación adjunta del producto. No se otorga ningún otro derecho de uso, venta o transferencia de (a) este producto ni (b) sus componentes de forma expresa, implícita o por impedimento legal. Este producto es exclusivamente para investigación. Los usos diagnósticos requieren una licencia independiente de Biotium, Inc. Para obtener información sobre la adquisición de una licencia para este producto, incluso para fines distintos a la investigación, comuníquese con Biotium, Inc., 3159 Corporate Place, Hayward, CA 94545, Tel.: (510) 265-1027. Fax: (510) 265-1352. Correo electrónico: btinfo@biotium.com. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem, se debe tener especial cuidado al utilizar citómetros multiláser, ya que pueden excitar directamente tanto la PE como el CF™594. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Es posible que la reactividad cruzada entre especies detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.