BD, 565230, BD Horizon™ BV421 Antitransferasa terminal humana (TdT) de ratón

Nombre alternativo: TdT; DNTT; Transferasa terminal; Enzima de adición terminal
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: Ratón BALB/c IgG1, κ
Inmunógeno: TdT humana purificada
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_2739124
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con BD Horizon BV421 en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el BD Horizon BV421 libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Para obtener resultados óptimos y reproducibles, se debe utilizar el tampón de tinción BD Horizon Brilliant siempre que se utilicen dos o más colorantes BD Horizon Brilliant en el mismo experimento. Las interacciones de los colorantes fluorescentes pueden causar artefactos de tinción que pueden afectar la interpretación de los datos. El tampón de tinción BD Horizon Brilliant se diseñó para minimizar estas interacciones. Puede encontrar más información en la hoja de datos técnicos del tampón de tinción BD Horizon Brilliant (n.º de cat. 563794). Protocolo de tinción: 1. Recoja las células diana cultivadas en un tubo de centrífuga cónico de 50 ml. Centrifugue a 1000 rpm durante 10 minutos, aspire y deseche el sobrenadante. 2. Lave el sedimento celular una vez con PBS y mezcle suavemente. Centrifugue a 1000 rpm durante 10 minutos, aspire y deseche el sobrenadante. 3. Fije las células añadiendo 15-20 ml de formaldehído al 1% mientras agita el pellet en vórtex e incube durante 20 minutos a temperatura ambiente. Centrifugue a 1000 rpm durante 10 minutos, aspire y deseche el sobrenadante. 4. Añada 15-20 ml de Triton™ X-100 al 0,1% en PBS e incube durante 5-10 minutos. Centrifugue a 1000 rpm durante 10 minutos, aspire y deseche el sobrenadante. 5. Resuspenda las células en PBS + 1% FBS (tampón de lavado) hasta una concentración final de aproximadamente 1 x 10^6 células por 50 µl. 6. Prepare un tubo con 50 µl de suspensión celular y añada 20 µl de anticuerpo fluorescente anti-TdT humana. Prepare otro tubo con 50 µl de suspensión celular y añada 20 µl de un control de isotipo de Ig fluorescente compatible. Mezcle suavemente el contenido del tubo e incube en oscuridad a temperatura ambiente durante 20-30 minutos. 7. Lave las células con 2 ml de tampón de lavado por tubo. Centrifugue durante 5 minutos a 1000 rpm, aspire y deseche el sobrenadante. 8. Resuspenda las células en 500 µl de tampón de lavado y analice mediante citometría de flujo.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Triton es una marca registrada de Dow Chemical Company. Pacific Blue™ es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés.