BD, 567021, BD Pharmingen™ Anti-CD16/CD32 de rata purificado

Nombre alternativo: Fcgr3/Fcgr2b; Fc gamma RIII/Fc gamma RIIB; FcγRIII/FcγRIIB
Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: Rata WI, también conocida como Wistar (exogámica) IgG2a, λ
Inmunógeno: células pre-B de ratón
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID del gen Entrez: 14130, 14131
ID de registro: AB_2870011
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Bloqueo del receptor Fc para análisis de citometría de flujo Para reducir la unión mediada por el receptor Fc por anticuerpos de interés a células que expresan CD16 y/o CD32 para análisis de citometría de flujo: 1. Preincubar la suspensión celular con anticuerpo Ab93 purificado (n.º de cat. 567021) a ≤ 1 μg de Ab93/millón de células en 100 μl) a 4˚C durante 5 minutos. 2. Añadir el anticuerpo de interés directamente a las células preincubadas con anticuerpo Ab93 purificado (es decir, el anticuerpo Ab93 purificado no se lava antes de teñir las células). 3. Si se utiliza un anticuerpo de segundo paso anti-Ig, el reactivo secundario debe elegirse de forma que no se una a (reaccione de forma cruzada con) anticuerpo Ab93 purificado que tiene un isotipo IgG2a de rata, λ. Las BD™ CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar la dispersión de fluorescencia (compensación). Cuando los anticuerpos conjugados con fluorocromos se unen a las BD CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos puede haber pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de dispersión diferentes a los de los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, se compare la dispersión en las células y en las BD CompBeads para asegurarse de que sean adecuadas para su aplicación celular específica.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La azida sódica es un inhibidor reversible del metabolismo oxidativo; por lo tanto, las preparaciones de anticuerpos que contienen este conservante no deben utilizarse en cultivos celulares ni inyectarse en animales. La azida sódica puede eliminarse lavando las células teñidas o el anticuerpo unido a la placa, o dializando el anticuerpo soluble en un tampón sin azida sódica. Dado que la endotoxina también puede afectar los resultados de los estudios funcionales, recomendamos el formato de anticuerpo NA/LE (sin azida/bajo endotoxina), si está disponible, para uso in vitro e in vivo. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos.