BD, 571265, BD Horizon™ RB613 Anti-Ki-67 humano de ratón

Nombre alternativo: Antígeno KI-67; Antígeno Ki67; KI-67; KI67; MKI67
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: Ratón BALB/c IgG1, κ
Inmunógeno: Núcleos de la línea celular de linfoma de Hodgkin humano L428
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl/prueba
ID del gen Entrez: 4288
ID de registro: AB_3686369
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con el colorante en condiciones óptimas y se eliminó el colorante no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Las BD® CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar la compensación de fluorescencia. Al unir anticuerpos conjugados con fluorocromos a las BD® CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos, puede haber pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de compensación que difieren de los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, se compare la compensación en las células y en las BD® CompBeads para garantizar que estas sean adecuadas para su aplicación celular específica.
Avisos del producto: Avisos del producto Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las hojas de datos de seguridad (SDS). CF™ es una marca registrada de Biotium, Inc. Para conocer las patentes estadounidenses que puedan corresponder, consulte bd.com/patents. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen por prueba recomendado. Normalmente utilizamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Se ha observado un fondo específico del donante humano en relación con la presencia de anticuerpos anti-polietilenglicol (PEG), desarrollados como resultado de ciertas vacunas que contienen PEG, incluidas algunas vacunas contra la COVID-19. Recomendamos el uso del tampón de tinción BD Horizon Brilliant™ en sus experimentos para ayudar a mitigar el posible fondo. Para obtener más información, visite https://www.bdbiosciences.com/en-us/support/product-notices. Al utilizar altas concentraciones de anticuerpo, se ha observado la unión de fondo de este colorante a los fragmentos eritroides producidos por lisis basada en cloruro de amonio, como con el tampón de lisis BD Pharm Lyse™ (n.° de cat. 555899), cuando el conjugado de anticuerpo estaba presente durante el procedimiento de lisis. Esto puede causar una tinción inespecífica de las células diana, como los leucocitos, que se han unido a los fragmentos eritroides resultantes. Este fondo se puede mitigar mediante cualquiera de los siguientes procedimientos: titulación del conjugado de anticuerpos a una concentración menor, fijación de las muestras con formaldehído o eliminación de los eritrocitos antes de la tinción (p. ej., centrifugación en gradiente o prelisis con lavado). Este fondo no se ha observado cuando las células se lisaron con BD FACS™ Lysing Solution (n.º de cat. 349202) después de la tinción. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: Recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para proteger la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a cualquier iluminación ambiental. La absorción de luz visible puede afectar significativamente los espectros de emisión y el rendimiento cuántico de los conjugados de fluorocromos en tándem. Los fluorocromos en tándem contienen un donante y un aceptor de energía. Aunque se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, se pueden observar diferencias en la emisión residual del donante. Además, los citómetros multiláser pueden excitar directamente tanto los fluorocromos donantes como los aceptores. Por lo tanto, recomendamos adquirir un control individual de tinción única para cada conjugado en tándem, a fin de generar una matriz de compensación o de desmezcla espectral.