Product Description
Nombre alternativo: IL3RA; IL-3RA; IL-3Rα; IL-3R-alfa; Subunidad alfa del receptor de interleucina-3
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG2a de ratón, κ
Inmunógeno: células humanas transfectadas con IL-3Ra
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
ID del gen Entrez: 3563
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con el colorante en condiciones óptimas y se eliminó el colorante no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Las BD® CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar la compensación de fluorescencia. Al unir anticuerpos conjugados con fluorocromos a las BD® CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos, puede haber pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de compensación que difieren de los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, se compare la compensación en las células y en las BD® CompBeads para garantizar que estas sean adecuadas para su aplicación celular específica.
Avisos del producto: Avisos del producto Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Este reactivo ha sido prediluido para su uso en el volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Observe las siguientes precauciones: Recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para proteger la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con esos reactivos, a cualquier iluminación ambiental. La absorción de luz visible puede afectar significativamente los espectros de emisión y el rendimiento cuántico de los conjugados de fluorocromo en tándem. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Al utilizar altas concentraciones de anticuerpo, se ha observado una unión de fondo de este colorante a los fragmentos eritroides producidos por lisis con cloruro de amonio, como con el tampón de lisis BD Pharm Lyse™ (n.º de cat. 555899), cuando el conjugado de anticuerpo estaba presente durante el procedimiento de lisis. Esto puede causar una tinción inespecífica de las células diana, como los leucocitos, que se han unido a los fragmentos eritroides resultantes. Este fondo se puede mitigar mediante cualquiera de las siguientes medidas: titulación del conjugado de anticuerpo a una concentración menor, fijación de las muestras con formaldehído o eliminación de los eritrocitos antes de la tinción (p. ej., centrifugación en gradiente o prelisis con lavado). Este fondo no se ha observado cuando las células se lisaron con la solución de lisis BD FACS™ (n.º de cat. 349202) después de la tinción. Se ha observado un fondo específico del donante humano en relación con la presencia de anticuerpos anti-polietilenglicol (PEG), desarrollados como resultado de ciertas vacunas que contienen PEG, incluidas algunas vacunas contra la COVID-19. Recomendamos el uso del tampón de tinción BD Horizon Brilliant™ en sus experimentos para ayudar a mitigar el posible fondo. Para obtener más información, visite https://www.bdbiosciences.com/en-us/support/product-notices. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (SDS). Los fluorocromos en tándem contienen un donante y un aceptor de energía. Si bien se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, pueden observarse diferencias en la emisión residual del donante. Además, los citómetros multiláser pueden excitar directamente tanto el fluorocromo donante como el aceptor. Por lo tanto, recomendamos que para cada conjugado en tándem se adquiera un control de tinción individual compatible para generar una matriz de compensación o desmezcla espectral. Cy es una marca registrada de Global Life Sciences Solutions Germany GmbH o una filial que opera bajo el nombre de Cytiva. Para consultar las patentes estadounidenses aplicables, consulte bd.com/patents.
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Collaboration
Tony Tang
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