Product Description
Nombre alternativo: CD3-épsilon; CD3E; Leu4; Antígeno de superficie de células T cadena épsilon T3/Leu-4; T3E
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: Ratón BALB/c IgG1, κ
Inmunógeno: Timocitos humanos
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Número de taller: II T118; III T492
ID del gen Entrez: 916
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con el colorante en condiciones óptimas y se eliminó el colorante no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Los controles de compensación o desmezcla basados en microesferas, como BD® CompBeads o BD™ SpectraComp™, pueden utilizarse como sustitutos para evaluar el derrame de fluorescencia al unirse a anticuerpos conjugados con fluorocromos. Si bien estas microesferas tienen propiedades espectrales similares a las de las células, pueden producirse variaciones en la emisión espectral, lo que resulta en valores de derrame diferentes en comparación con los controles biológicos. Por lo tanto, se recomienda comparar el derrame obtenido de las células y los controles basados en microesferas al utilizar BD® CompBeads o BD™ SpectraComp™ por primera vez, para garantizar que sean adecuados para la aplicación prevista.
Avisos del producto: Avisos del producto Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las hojas de datos de seguridad (SDS). Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Para conocer las patentes de EE. UU. que puedan corresponder, consulte bd.com/patents. Cuando se utilizan altas concentraciones de anticuerpo, se ha observado la unión de fondo de este colorante a los fragmentos eritroides producidos por la lisis basada en cloruro de amonio, como con el tampón de lisis BD Pharm Lyse™ (n.º de cat. 555899), cuando el conjugado de anticuerpo estaba presente durante el procedimiento de lisis. Esto puede causar una tinción inespecífica de las células diana, como los leucocitos, que se han unido a los fragmentos eritroides resultantes. Este fondo puede mitigarse mediante cualquiera de las siguientes medidas: reducir la concentración del conjugado de anticuerpo, fijar las muestras con formaldehído o eliminar los eritrocitos antes de la tinción (p. ej., centrifugación en gradiente o prelisis con lavado). Este fondo no se ha observado al lisar las células con la solución de lisis BD FACS™ (n.º de cat. 349202) después de la tinción. Este reactivo se ha prediluido para su uso al volumen por prueba recomendado. Normalmente utilizamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Para obtener información sobre los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: Recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para proteger la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a cualquier iluminación ambiental. La absorción de la luz visible puede afectar significativamente los espectros de emisión y el rendimiento cuántico de los conjugados de fluorocromos en tándem. Los fluorocromos en tándem contienen un donante y un aceptor de energía. Aunque se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, se pueden observar diferencias en la emisión residual del donante. Además, los citómetros multiláser pueden excitar directamente los fluorocromos donante y aceptor. Por lo tanto, recomendamos que para cada conjugado en tándem se adquiera un control de tinción única individual coincidente para generar una matriz de compensación o desmezcla espectral. Cy es una marca registrada de Global Life Sciences Solutions Germany GmbH o una filial que opera como Cytiva. Se ha observado un fondo específico del donante humano en relación con la presencia de anticuerpos anti-polietilenglicol (PEG), desarrollados como resultado de ciertas vacunas que contienen PEG, incluidas algunas vacunas contra la COVID-19. Recomendamos el uso del tampón de tinción BD Horizon Brilliant™ en sus experimentos para ayudar a mitigar el posible fondo. Para más información, visite https://www.bdbiosciences.com/en-us/support/product-notices.
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Collaboration
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