BD, 572438, BD Horizon™ RB824 Ratón anti-CD16 humano

Nombre alternativo: CD16;CD16A;FCGR3A;FcγRIIIA;FcRIIIa;CD16B;FCGR3B;FcγRIIIB;FcRIIIb
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: Ratón BALB/cx DBA/2, también conocido como CD2F1 o CDF1 IgG1, κ
Inmunógeno: leucocitos polimorfonucleares humanos
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Número de taller: IV N409; V MR5, NK80
ID del gen Entrez: 2214, 2215
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con el colorante en condiciones óptimas y se eliminó el colorante no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Los controles de compensación o desmezcla con microesferas, como BD® CompBeads o BD™ SpectraComp™, pueden utilizarse como sustitutos para evaluar el derrame de fluorescencia al unirse a anticuerpos conjugados con fluorocromos. Si bien estas microesferas tienen propiedades espectrales similares a las de las células, pueden producirse variaciones en la emisión espectral, lo que resulta en valores de derrame diferentes en comparación con los controles biológicos. Por lo tanto, se recomienda comparar el derrame obtenido de las células y los controles con microesferas al utilizar BD® CompBeads o BD™ SpectraComp™ por primera vez, para garantizar que sean adecuados para la aplicación prevista.
Avisos del producto: Al utilizar altas concentraciones de anticuerpo, se ha observado una unión de fondo de este colorante a los fragmentos eritroides producidos por lisis con cloruro de amonio, como con el tampón de lisis BD Pharm Lyse™ (n.° de cat. 555899), cuando el conjugado de anticuerpo estaba presente durante el procedimiento de lisis. Esto puede causar una tinción inespecífica de las células diana, como los leucocitos, que se han unido a los fragmentos eritroides resultantes. Este fondo se puede mitigar mediante cualquiera de las siguientes medidas: titulación del conjugado de anticuerpo a una concentración menor, fijación de las muestras con formaldehído o eliminación de los eritrocitos antes de la tinción (p. ej., centrifugación en gradiente o prelisis con lavado). Este fondo no se ha observado cuando las células se lisaron con la solución de lisis BD FACS™ (n.° de cat. 349202) después de la tinción. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen por prueba recomendado. Normalmente utilizamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Para los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las hojas de datos de seguridad (SDS). Es posible que la reactividad cruzada de especies detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Se ha observado un trasfondo específico del donante humano en relación con la presencia de anticuerpos anti-polietilenglicol (PEG), desarrollados como resultado de ciertas vacunas que contienen PEG, incluidas algunas vacunas contra la COVID-19. Recomendamos el uso del tampón de tinción BD Horizon Brilliant™ en sus experimentos para ayudar a mitigar el posible fondo. Para obtener más información, visite https://www.bdbiosciences.com/en-us/support/product-notices. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: Recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para proteger la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la iluminación ambiental. La absorción de luz visible puede afectar significativamente los espectros de emisión y el rendimiento cuántico de los conjugados de fluorocromos en tándem. Los fluorocromos en tándem contienen un donante y un aceptor de energía. Aunque se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, pueden observarse diferencias en la emisión residual del donante. Además, los citómetros multiláser pueden excitar directamente tanto los fluorocromos donante como los aceptores. Por lo tanto, recomendamos adquirir un control individual de tinción única para cada conjugado en tándem, a fin de generar una matriz de compensación o desmezcla espectral. Para consultar las patentes estadounidenses aplicables, consulte bd.com/patents.