BD, 940528, BD® AbSeq Oligo Anti-Biotina de Ratón

Vol. por prueba: 2 µl/prueba
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Solicitud: Secuenciación de 3' de células individuales (calificada)
Secuencia de código de barras: ATTAGGTTTCAGGCGGTCGGGAGAGTGTATGTCAGT
ID de secuencia: AHS0533
Inmunógeno: Hemocianina de lapa conjugada con biotina (KLH)
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Especie hospedadora: Ratón
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad y se conjugó con el oligonucleótido BD® AbSeq en condiciones óptimas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Coloque todos los reactivos BD® AbSeq que se van a agrupar en una gradilla de cierre para tubos de 500 µL (Thermo Fisher Scientific, n.º de cat. 4900). Coloque los tubos de forma que se puedan destapar y volver a tapar fácilmente con una tapadora de tubos con tapón de rosca de 8 canales (Thermo Fisher Scientific, n.º de cat. 4105MAT) y alícuota los reactivos con una pipeta multicanal. Los tubos BD® AbSeq deben centrifugarse durante ≥ 30 segundos a 400 × g para asegurar la eliminación del contenido de las roscas del tapón/tubo antes de la primera apertura. Definiciones: Anticuerpo primario: el anticuerpo se une directamente al epítopo de la proteína diana Anticuerpo secundario: este anticuerpo se une al anticuerpo primario Debido a que el objetivo de este anticuerpo puede variar en función del objetivo primario, se recomienda optimizar la concentración del anticuerpo antes de su uso siguiendo el protocolo de análisis de citometría de flujo de BD™ AbSeq Ab-Oligo y expresión de etiqueta de muestra (ID de documento: 232502 Rev. 2.0. Consulte https://www.bdbiosciences.com/content/dam/bdb/marketing-documents/BD-AbSeq-Ab-Oligo-Flow-Cytometry-Analysis-User-Guide.pdf). La concentración inicial de este anticuerpo es de 0,5 µg/µL y puede ser necesaria una dilución para maximizar la relación señal-ruido, ya que la cantidad de anticuerpo depende de la concentración del anticuerpo primario. Protocolo de tinción 1) (opcional) Trate las células con el bloque Fc a. Prepare la mezcla del bloque Fc combinando 114 µL de tampón de tinción BD Pharmingen™ (FBS) con 6 µL de bloque Fc humano o de ratón BD (PN 564220 o 553142, respectivamente) y mezcle bien con la pipeta. b. Sedimente las células centrifugando a 400 xg durante 5 minutos. Decante el sobrenadante. c. Añada 110 µL de la mezcla del bloque Fc al sedimento celular. d. Incube las células a temperatura ambiente durante 10 minutos. 2) Teñir con el anticuerpo primario. a. Prepare la mezcla del anticuerpo primario combinando el volumen óptimo de anticuerpo primario (consulte la ficha técnica del producto del anticuerpo primario) con 98 µL de tampón de tinción BD Pharmingen™ (FBS) y mezcle bien con la pipeta. b. Transfiera 100 µL de la suspensión que contiene células a la mezcla del anticuerpo primario, para un volumen de tinción total de 200 µL. c. Incubar durante 30-60 minutos en hielo. d. (Nota: Durante esta incubación, se recomienda agrupar el anticuerpo AbSeq secundario con cualquier AbSeq adicional que se vaya a incluir en el ensayo. Consulte uno de los protocolos de etiquetado de células individuales del sistema BD Rhapsody con BD® AbSeq Ab-Oligos enumerados en el paso 3a para obtener orientación). e. Agregar 2 mL de tampón de tinción BD Pharmingen™ (FBS) y mezclar suavemente pipeteando, evitando burbujas. f. Sedimentar las células centrifugando a 400 xg durante 5 minutos. Decante el sobrenadante. g. Repetir los pasos de 2x para un total de 3 lavados. h. Después del tercer lavado, suspender las células en 100 µL de tampón de tinción BD Pharmingen™ (FBS). 3) Teñir con anticuerpo secundario a. Teñir las células con el grupo de AbSeq preparado durante el paso de incubación C, consultando uno de los protocolos de AbSeq a continuación según sea necesario. • Etiquetado de células individuales con BD® AbSeq Ab-Oligos (41 a 100 plex) (Doc ID: 23-22314) • Etiquetado de células individuales con kits de multiplexación de células individuales BD® y BD® AbSeq Ab-Oligos (1 a 40 plex) (Doc ID:23-21339) • Etiquetado de células individuales con kits de multiplexación de células individuales BD® y BD® AbSeq Ab-Oligos (41 a 100 plex) (Doc ID: 23-22354) • Etiquetado de células individuales con kits de multiplexación de células individuales BD® Flex y BD® AbSeq Ab-Oligos (1 plex a 100 plex) (Doc ID:23-24312) Los archivos de referencia de secuenciación se pueden crear utilizando el generador de referencia del panel BD® AbSeq (https://abseq-ref-gen.genomics.bd.com/). Siga los protocolos estándar de seguridad de laboratorio. Lea y comprenda las fichas de datos de seguridad (FDS) antes de manipular productos químicos. Para obtener las FDS, visite regdocs.bd.com o contacte con el soporte técnico de BD Biosciences en scomix@bdscomix.bd.com. Advertencia: Todas las muestras biológicas y los materiales que entren en contacto con ellas se consideran biopeligrosos. Manipule como si pudieran transmitir infecciones y deséchelas con las precauciones adecuadas, de acuerdo con las normativas federales, estatales y locales. Nunca pipetee con la boca. Use ropa, gafas y guantes de protección adecuados.
Avisos del producto: Avisos del producto Consulte https://www.bdbiosciences.com/en-us/resources/protocols/single-cell-multiomics para conocer los protocolos técnicos. Este reactivo ha sido prediluido para su uso en el volumen recomendado por prueba. El uso típico es de 2 µl para 1 × 10^6 células en una reacción de tinción de 200 µl. Para obtener mejores resultados, cierre bien las tapas después de usar y antes de almacenar. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Siga las pautas estatales y locales al desechar residuos peligrosos. El proceso de producción se sometió a rigurosas pruebas y validación para garantizar que genere un conjugado de alta calidad con un rendimiento constante y una actividad de unión específica. Sin embargo, no se han realizado pruebas de verificación en todos los lotes de conjugado. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Para conocer las patentes estadounidenses aplicables, consulte bd.com/patents.